Составители:
Рубрика:
А.Ф.Сайфитдинова 49
проводить прижизненные исследования самых разнообразных белковых
молекул, кроме того, они успешно применяются в сочетании с другими
методами флуоресцентной микроскопии. Так, линия клеток HeLa, несущая
гистон Н2В, слитый с GFP, позволяет проводить прижизненные наблюдения за
изменением состояния хроматина в течение клеточного цикла, а также
совмещать данные этих исследований с результатами FISH и
иммуноцитохимического окрашивания.
В настоящее время из различных, преимущественно глубоководных
морских организмов клонировано множество флуоресцирующих белков,
различающихся по аминокислотной последовательности, пространственной
организации белковой молекулы и спектральным характеристикам (Таблица
2.4).
Таблица 2.4. Список клонированных флуоресцирующих белков
Название GenBank Происхождение Возб., нм Излуч., нм
amajGFP (amFP486) AF168421
Anemonia maiano
458 486
dstrGFP (dsFP483) AF168420
Discosoma striata
456 484
clavGFP (cFP484) AF168424
Clavularia sp.
443 483
GFP M62653
Aequorea victoria
395, 471 508
cgigGFP AY037776
Condylactis gigantea
399, 482 496
hcriGFP AF420592
Heteractis crispa
405, 481 500
ptilGFP AY015995
Ptilosarcus sp.
500 508
rmueGFP AY015996
Renilla muellenri
498 510
zoanGFP (zFP506) AF168422
Zoanthus sp.
496 506
asulGFP (asFP499) AF322221
Anemonia sulcata
403, 480 499
disGFP AF420593
Discosoma sp. 3
503 512
dendGFP AF420591
Dendronephthya sp
494 508
mcavGFP AY037769
Montastraea cavemosa
506 516
rfloGFP AY037772
Ricordea florida
508 518
scubGFP AY037771
Scolymia cubensis
497 506
zoanYFP AF168423
Zoanthus sp.
494, 528 538
DsRed (drFP583) AF168419
Discosoma sp. 1
558 583
dis2RFP (dsFP593) AF272711
Discosoma sp. 2
573 593
zoan2RFP AY059642
Zoanthus sp. 2
552 576
cpFP611 AY130757
Entacmaea quadricolor
559 611
mcavRFP AY037770
Montastraea cavemosa
508, 572 520, 580
rfloRFP AY037773
Ricordea florida
506, 566 517, 574
Kaede AB085641
Trachyphyllia geoffroyi
488, 543 518, 582
Белок GFP имеет небольшой свободный участок на C-конце , поэтому его
обычно соединяют с N-концом исследуемого белка. А вот при создании
слитных конструкций на основе DsRed С-конец исследуемого белка соединяют
с N-концом флуоресцирующего домена, так как его С-конец необходим для
формирования тетрамерных комплексов. К сожалению, иногда попытки
создания слитных конструкций на основе флуоресцентных белков дикого типа
осложняются проблемами, связанными с нарушениями процессов его
правильной укладки в пространстве. Введение различных мутаций позволяет
стабилизировать процесс формирования флуоресцентного домена слитного
белка. В результате этих исследований были созданы целые семейства
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 50
- 51
- 52
- 53
- 54
- …
- следующая ›
- последняя »
