Торф: химический анализ и основы комплексной переработки. Сергеева М.А - 63 стр.

UptoLike

Рубрика: 

63
мешать в фарфоровой чашке стеклянной палочкой с несколькими миллилитрами 0,2 %-ного
раствора соды до пастообразного состояния. А затем добавить остальное количество соды
при тщательном перемешивании. Раствор о-фенилантраниловой кислоты хранится долго.
Ход работы:
В термостойкие конические колбы на 100 мл отбирают пипеткой 10–20 мл водной вытяжки
(в зависимости от цвета вытяжки: при темно-коричневой – 10 мл, при светло-коричневой – 20 мл).
Отобранную вытяжку выпаривают на водяной бане до влажных солей. При этом необходимо сле-
дить, чтобы содержимое колб не кипело. По окончании выпаривания проводится окисление органи-
ческого вещества хромовой смесью. Для этого из бюретки по каплям приливают в каждую колбу
по 5–10 мл хромовой смеси (в зависимости от цвета вытяжки: при вытяжке светлого оттенка – 5 мл,
темного оттенка – 10 мл), колбы накрывают маленькими воронками и помещают на 20 мин в су-
шильный шкаф, предварительно нагретый до температуры 150–160 ºС. Параллельно определяют
контрольную пробу – с 5 или 10 мл хромовой смеси. В подготовленные растворы добавляют 2–3 кап-
ли фенилантраниловой кислоты и титруют солью Мора до перехода темно-оранжевой окраски в зе-
леную. Титрование можно проводить, не остужая раствор.
Полученные результаты заносят в таблицу (прил. 10).
Массу водорастворимого углерода (m) в мг/100 г с. в. рассчитывают по формуле:
, (35)
где х – количество соли Мора, пошедшей на титрование контрольного раствора, мл; а – количество
соли Мора, пошедшее на титрование анализируемой вытяжки, мл; V – общий объем фильтрата, мл;
V
1
– объем фильтрата, взятый для определения, мл; 0,003 – коэффициент пересчета на углерод;
k
w
– коэффициент влажности; m
1
– масса навески, г; N – нормальность соли Мора; 100 – для пере-
счета на 100 г.
Пример: Навеску грунта массой 2 г (коэффициент влажности – 1,4) залили 100 мл дистилли-
рованной воды. Из полученной водной вытяжки для дальнейшего анализа было отобрано 10 мл, по-
сле выпаривания которых к оставшемуся осадку добавили 5 мл хромовой смеси. После нагревания
в сушильном шкафу и добавления фенилантраниловой кислоты растворы титровали солью Мора.
Параллельно определили контрольную пробу с 5 мл хромовой смеси. На титрование контрольной
пробы было израсходовано 4,5 мл соли, на титрование анализируемой вытяжки – 2,1 мл.
Таким образом, масса водорастворимого углерода (m) в мг/100 г с. в. составила:
Лабораторная работа 3.4.
«Определение полифенолоксидазной и пероксидазной активности грунта»
Фермент полифенолоксидаза катализирует окисление фенолов (моно-, ди-, три-) до хинонов
в присутствии кислорода воздуха.
Пероксидаза катализирует окисление органических веществ почв (моно-, ди-, трифенолов,
аминов, некоторых гетероциклических соединений) за счет кислорода, выделяющегося при разло-
жении водорода и других органических перекисей. Под действием кислорода перекиси при участии
пероксидазы полифенолы окисляются и переходят в хиноны.
Цель работы: определить ферментативную активность разных типов грунта на примере по-
лифенолоксидазы и пероксидазы.
Оборудование и реактивы:
1. Фотоколориметр, весы лабораторные с погрешностью взвешивания не более 0,0001 г, термостат.
2. Конические колбы на 50 мл с притертыми пробками, воронки, пипетки на 1 и 10 мл, фильтр
синяя лента, мерные колбы на 25 мл.
3. Дистиллированная вода, 70 %-ный этиловый спирт, 0,5 %-ный раствор перекиси водорода,
фосфатный буфер с рН 5,8, 1 %-ный раствор гидрохинона, стандартный раствор хинона.