Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 51 стр.

7) 100% ацетон (ч.д.а.)
8) 100% пропилен (ч.д.а.).
9) эпоксидные смолы DDSA, эпон-812, MNA и катализатор DMP-30 («Sigma-
Aldrich»).
        Приготовление смолы для заливки. В чистую сухую посуду добавить 25
мл эпон-812, 10 мл DDSA, 15 мл MNA и 1мл DMP-30. Перемешивать на
мешалке в течение 1-1,5 часов. Готовить под тягой! Токсичное вещество!
        В процессе заливки образцов используют смесь смол с пропиленом в
следующих соотношениях: 1:2, 1:1, 2:1. Смеси из смолы и пропилена готовят
непосредственно перед заливкой!
10) 0,3% цитрат свинца (Прокипятить 50 мл дистиллированной воды в колбе с
плотно закрытой ватной пробкой. Быстро охладить. Добавить 0,15 г цитрата
свинца. Интенсивно перемешивать в течение 1 минуты. Добавить 0,5 мл 10 M
NaOH. Через сутки при наличии осадка добавлять щелочь по одной капле с
помощью пипетки до полного растворения осадка.
11)     2%   уранилацетат     (0,6   г   уранилацетата       растворить   в   30   мл
дистиллированной воды и оставить на 24 часа при температуре 6-8 °С).
                                     Ход работы
        Объект поместить в раствор 5 мМ СеСl3, приготовленный на 50 мМ 3-(N-
морфолино)пропансульфоновой кислоте (pH 7,2), на 1 час.
        Аккуратно   удалить     пипеткой    раствор      и    добавить    1,25%    ГА,
приготовленный на 50 мМ какодилатном буфере, выдержать 1 час.
        Удалить пипеткой предыдущий раствор и промыть объекты 50 мМ
какодилатным буфером дважды по 10 минут.
        Удалить пипеткой предыдущий раствор и добавить раствор OsO4 c
сахарозой. Оставить на 3 часа при температуре 6-8 °С.
        Удалить пипеткой предыдущий раствор и провести дегидратацию тканей
в     спиртах.   Выдерживать     объекты    в    растворах     этанола    восходящей
концентрации (30%, 50%, 70%) дважды по 15 минут. В 70% спирте можно
оставить на ночь при температуре 6-8 °С. В 96% спирте объект обезвоживать

                                            51