Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 49 стр.

UptoLike

Рубрика: 

49
при спектрофотометрических измерениях в качестве контроля. К другой пробе
добавить 0,4 мл 0,5% раствора ТБК. Пробы инкубировать на кипящей водяной
бане (100 °С) в течение 30 мин, затем охладить при комнатной температуре.
Измерения проводят на спектрофотометре при длине волны 532 нм, а
также при 600 нм для корректировки неспецифического поглощения (Hodges et
al., 1999).
Расчёты
Для вычисления содержания МДА используют коэффициент экстинкции
е = 155 мМ
-1
см
-1
.
Расчет производят по формуле:
С = ((ΔD/155)•Х•V)/((m•Δm)•1),
где:
С – количество МДА, ммоль/г сухого веса,
ΔD – разность оптической плотности образца при 532 нм и 600 нм,
155 – коэффициент экстинкции МДА при 532 нм, мМ
-1
см
-1
,
Х – разведение (общий объём реакционной смеси разделить на количество
вносимого образца экстракта),
V – объём вытяжки, мл,
mмасса сырой навески, г,
m – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.),
1 – длина оптического пути, см.
Измерения проводят в нескольких (не менее трёх) биологических и
аналитических повторностях. Стандартную ошибку вычисляют в программе
Microsoft Office Excel (опция «Описательная статистика»).
при спектрофотометрических измерениях в качестве контроля. К другой пробе
добавить 0,4 мл 0,5% раствора ТБК. Пробы инкубировать на кипящей водяной
бане (100 °С) в течение 30 мин, затем охладить при комнатной температуре.
       Измерения проводят на спектрофотометре при длине волны 532 нм, а
также при 600 нм для корректировки неспецифического поглощения (Hodges et
al., 1999).
                                   Расчёты
       Для вычисления содержания МДА используют коэффициент экстинкции
е = 155 мМ-1см-1.
       Расчет производят по формуле:
                         С = ((ΔD/155)•Х•V)/((m•Δm)•1),
где:
С – количество МДА, ммоль/г сухого веса,
ΔD – разность оптической плотности образца при 532 нм и 600 нм,
155 – коэффициент экстинкции МДА при 532 нм, мМ-1см-1,
Х – разведение (общий объём реакционной смеси разделить на количество
       вносимого образца экстракта),
V – объём вытяжки, мл,
m – масса сырой навески, г,
m – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.),
1 – длина оптического пути, см.
       Измерения проводят в нескольких (не менее трёх) биологических и
аналитических повторностях. Стандартную ошибку вычисляют в программе
Microsoft Office Excel (опция «Описательная статистика»).




                                         49