Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 47 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

КФУ | Казань

Составители: 

Рубрика: 

47
560 нм.
Построение калибровочной кривой
Приготовить сток-раствор перекиси водорода (1 мкл 3% перекиси
разводят в 10 мл ацетона). Затем приготовить растворы перекиси водорода
различной концентрации (см. табл.).
Далее к растворам перекиси водорода с известной концентрацией
добавить реактив ксиленоловый оранжевый и проводить измерения, как
описано ранее.
По полученным данным строят калибровочную кривую в координатах
оптическая плотность–концентрация перекиси водорода.
Примечание: В случае возникновения затруднений измерения
оптической плотности необходимо изменить разведение пробы.
Рекомендуется ознакомиться со статьей Queval с соавт. (2008).
Расчёты
Содержание перекиси водорода определяют по калибровочной кривой,
построенной с использованием известных концентраций H
2
O
2
, исходя из
результатов измерений оптической плотности образцов.
Для расчета содержания перекиси водорода (мкмоль/г сухого веса)
Концентрация
перекиси водорода,
нг/мл
Количество
сток-раствора,
мкл
Количество
растворителя,
мкл
1500 500 500
1000 330 670
750 250 750
600 200 800
500 167 833
429 143 857
333 111 889
300 100 900
273 90 910 
560 нм.
     Построение калибровочной кривой
     Приготовить сток-раствор перекиси водорода (1 мкл 3% перекиси
разводят в 10 мл ацетона). Затем приготовить растворы перекиси водорода
различной концентрации (см. табл.).

       Концентрация                Количество                 Количество
  перекиси водорода,              сток-раствора,          растворителя,
        нг/мл                          мкл                       мкл
             1500                         500                       500
             1000                         330                       670
              750                         250                       750
              600                         200                       800
              500                         167                       833
              429                         143                       857
              333                         111                       889
              300                         100                       900
              273                         90                        910


     Далее к растворам перекиси водорода с известной концентрацией
добавить реактив ксиленоловый оранжевый и проводить измерения, как
описано ранее.
     По полученным данным строят калибровочную кривую в координатах
оптическая плотность–концентрация перекиси водорода.
     Примечание:     В   случае       возникновения   затруднений    измерения
оптической плотности необходимо изменить разведение пробы.
     Рекомендуется ознакомиться со статьей Queval с соавт. (2008).
                                  Расчёты
     Содержание перекиси водорода определяют по калибровочной кривой,
построенной с использованием известных концентраций H2O2, исходя из
результатов измерений оптической плотности образцов.
     Для расчета содержания перекиси водорода (мкмоль/г сухого веса)

                                          47

Страницы