Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 48 стр.

используют формулу:
                             С = ((К•V•X)/(m•Δm))/880,
где:
С – содержание Н2О2, мкмоль/г сухого веса,
К – концентрация Н2О2 (определяется по калибровочной кривой), нг/мл,
V – общий объём экстракта, мл,
X – разведение (отношение количества внесенного образца к общему объёму
       реакционной смеси),
m – масса сырой навески, г,
m – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.),
880 – коэффициент перевода нг в мкмоль.
       Измерение содержания перекиси водорода проводят в нескольких
повторностях (не менее трёх). Стандартную ошибку вычисляют в программе
Microsoft Office Excel (опция «Описательная статистика»).


          4.2. Определение уровня перекисного окисления липидов
                   (содержания малонового диальдегида)
       Об уровне перекисного окисления липидов (ПОЛ) судят по накоплению
продукта ПОЛ – малонового диальдегида (МДА). Содержание МДА оценивают
по степени накопления продукта его реакции с тиобарбитуровой кислотой
(ТБК) (Kumar, Knowles, 1993).
                             Необходимые реактивы:
1) 20% ТХУ (20 г сухой ТХУ растворить в 100 мл дистиллированной воды).
2) 0,5% раствор ТБК (50 мг ТБК растворить в 10 мл 20% ТХУ).
                                   Ход работы
       500 мг каллусной ткани растереть с 1 мл 20% ТХУ. Полученный
гомогенат центрифугировать в течение 5 мин при 12 000 g. Полученный
супернатант использовать в качестве образца для анализа.
       В две плотно закрывающиеся пробирки внести по 0,4 мл супернатанта. К
одной из проб добавить 0,4 мл 20% ТХУ; в дальнейшем эту пробу использовать

                                           48