Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 56 стр.

соотношение     объёма    реагента    к    образцу       равное   50:1    (минимально
рекомендуемый объём соответствует 200 мкл реагента и 4 мкл образца – в
данном случае измерение поглощения при 595 нм проводят в кювете с длиной
оптического пути 1 мм).
     Построение калибровочной кривой
     Калибровочную        кривую     строят,     используя    бычий      сывороточный
альбумин (БСА) или яичный альбумин.
     Приготовление сток-раствора БСА: 10 мг БСА растворить в 10 мл
дистиллированной воды (лучше MQ). Приготовить растворы белка в пределах
известных концентраций 0,01-0,1 мг/мл (см. табл.). Провести измерения
оптической плотности согласно ранее изложенному ходу работы.
 Концентрация белка,         объём сток-раствора,                 объём воды,
       мкг/мл                        мкл                              мкл
         10                           10                              990
           30                             30                             970
           50                             50                             950
           75                             75                             925
          100                             100                            900


                                     Расчёты:
     Построить    калибровочную        кривую        в   координатах     концентрация
белка-оптическая плотность. Содержание белка в пробе в мг/л определить по
калибровочной кривой.
     Измерения проводят в нескольких (не менее трёх) биологических и
аналитических повторностях. Стандартную ошибку вычисляют в программе
Microsoft Office Excel (опция «Описательная статистика»).




                                                56