Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 55 стр.

UptoLike

Рубрика: 

55
Цинк требуется для поддержания активности многих ферментов, а
также для синтеза хлорофилла; входит в состав карбоангидразы. Кроме того,
цинк активирует дыхательные ферменты. Цинк играет важную роль в обра-
зовании ИУК, ускоряя синтез ее предшественника - триптофана. При отсут-
ствии данного элемента формируются чахлые растения со слабо развитым
апикальным доминированием (Кузнецов, Дмитриева, 2005).
5.1.Определение железа с о-фенантролином
Содержание железа в растениях обычно составляет сотые доли
процента на сухую массу. При определении железа, как правило, ис-
пользуют колориметрические методы. Наиболее распространенным из
них является метод определения железа с о-фенантролином. Он основан
на измерении интенсивности окраски комплекса 1,10-фенантролина
12
Н
8
N
2
·HO
2
) c ионами Fe
2+
. Чувствительность данного метода состав-
ляет 0,005 мкг/мл.
Реактивы и оборудование: HCl онц.); аммиак онц.); 0, H
2
SO
4
; 10%-ный
раствор гидроксиламин; 0,1%-ный раствор о-фенантролина; сульфат закисного железа
(FeSO
4
·7H
2
O) (перекристаллизованный); индикаторная бумага конго-рот (2×2); фарфоровые
тигли; колбы на 50 мл (25 шт.); муфельная печь; ФЭК.
Ход работы:
1. Пробы растительного материала (300–500 мг) помещают в
фарфоровые тигли и обугливают с 3–5 мл спирта. Раствор озоляют в
муфеле при 450-500ºС со всеми предосторожностями, необходимыми во
избежание потерь материала.
2. Полученную золу растворяют в 4 мл концентрированной HCl и
количественно переносят небольшим объемом воды в мерную колбу на 50
мл (можно использовать и мокрое озоление смесью H
2
SO
4
и HNO
3
).
3. Для восстановления железа до Fe
2+
в колбу добавляют 4 мл 10%-
ного раствора гидроксиламина и содержимое энергично встряхивают.
4. Затем туда приливают 1 мл 0,1%-ного раствора о-фенантролина
в спирте и бросают в раствор маленький (2×2) кусок индикаторной бумаги
конго-рот, при этом бумага окрашивается в синий цвет.
5. В колбу по каплям начинают приливать концентрированный
раствор NH
3
, встряхивая ее после каждой капли до тех пор, пока инди-
каторная бумага не покраснеет от одной капли. Красно-оранжевая
окраска появляется через 5 мин и отличается большой устойчивостью.
6. Оптическую плотность раствора измеряют на спектрофото-
метре при =510 нм. Содержание железа рассчитывают в мг на 1 г су-
хой массы ткани по калибровочной кривой.
        Цинк требуется для поддержания активности многих ферментов, а
также для синтеза хлорофилла; входит в состав карбоангидразы. Кроме того,
цинк активирует дыхательные ферменты. Цинк играет важную роль в обра-
зовании ИУК, ускоряя синтез ее предшественника - триптофана. При отсут-
ствии данного элемента формируются чахлые растения со слабо развитым
апикальным доминированием (Кузнецов, Дмитриева, 2005).

                      5.1.Определение железа с о-фенантролином

         Содержание железа в растениях обычно составляет сотые доли
процента на сухую массу. При определении железа, как правило, ис-
пользуют колориметрические методы. Наиболее распространенным из
них является метод определения железа с о-фенантролином. Он основан
на измерении интенсивности окраски комплекса 1,10-фенантролина
(С12Н8N2·HO2) c ионами Fe2+. Чувствительность данного метода состав-
ляет 0,005 мкг/мл.
          Реактивы и оборудование: HCl (конц.); аммиак (конц.); 0,1н H2SO4; 10%-ный
раствор гидроксиламин; 0,1%-ный раствор о-фенантролина; сульфат закисного железа
(FeSO4·7H2O) (перекристаллизованный); индикаторная бумага конго-рот (2×2); фарфоровые
тигли; колбы на 50 мл (25 шт.); муфельная печь; ФЭК.
         Ход работы:
         1. Пробы растительного материала (300–500 мг) помещают в
фарфоровые тигли и обугливают с 3–5 мл спирта. Раствор озоляют в
муфеле при 450-500ºС со всеми предосторожностями, необходимыми во
избежание потерь материала.
         2. Полученную золу растворяют в 4 мл концентрированной HCl и
количественно переносят небольшим объемом воды в мерную колбу на 50
мл (можно использовать и мокрое озоление смесью H2SO4 и HNO3).
         3. Для восстановления железа до Fe2+ в колбу добавляют 4 мл 10%-
ного раствора гидроксиламина и содержимое энергично встряхивают.
         4. Затем туда приливают 1 мл 0,1%-ного раствора о-фенантролина
в спирте и бросают в раствор маленький (2×2) кусок индикаторной бумаги
конго-рот, при этом бумага окрашивается в синий цвет.
         5. В колбу по каплям начинают приливать концентрированный
раствор NH3, встряхивая ее после каждой капли до тех пор, пока инди-
каторная бумага не покраснеет от одной капли. Красно-оранжевая
окраска появляется через 5 мин и отличается большой устойчивостью.
         6. Оптическую плотность раствора измеряют на спектрофото-
метре при =510 нм. Содержание железа рассчитывают в мг на 1 г су-
хой массы ткани по калибровочной кривой.


                                                                                  55