Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 43 стр.

UptoLike

Рубрика: 

42
петлю резко поднимают. Суспензия грамотрицательных бактерий становится
вязкой и тянется за петлей, образуя тяжи. Грамположительные бактерии
равномерно распределяются в капле щелочи. Реакция считается отрицательной,
если образования слизистых тяжей не наблюдается в течение 60 с. Образование
вязкой суспензии клеток грамотрицательных бактерий в щелочи связано с
лизисом клеточных стенок и освобождением ДНК. Метод используют в
качестве предварительного для диагностики. Существуют исключения,
например грамотрицательные флавобактерии не образуют в щелочи слизистых
тяжей.
"Негативная окраска" окраска капсул жидкой тушью заключается в
том, что клетки бактерий помещают сначала в каплю разбавленного
наполовину водой карболового фуксина Циля, а затем через 23 мин их
смешивают с каплей туши и размазывают по предметному стеклу краем
покровного стекла. После подсушивания препарат рассматривают под
микроскопом. Бесцветные капсулы резко выступают между темным фоном пре-
парата и окрашенными в красный цвет клетками бактерий.
Морфологию клеток исследуют в электронном микроскопе (см.
Приложение).
Актиномицеты
Методы выявления и количественного учета актиномицетов. Для
выявления и количественного учета стрептомицетов (наиболее
распространенных в почвах представителей актиномицетов, принадлежащих к
роду Streptomyces) чаще всего используют метод посева почвенной суспензии
на плотные среды крахмало-аммиачную, крахмало-казеиновую, казеин-
глицериновую, среду с хитином и др. (Звягинцев, Зенова, 2001).
Для наиболее полного выделения актиномицетов из почвы производят
механическую обработку образцов с целью десорбции клеток
микроорганизмов: растирание почвы, обработку ультразвуком на установке
УЗДН-1 (22 кГц, 0,44 А, в течение 2 мин; Звягинцев, 1987).
В качестве селектирующих агентов при выделении стрептомицетов из
петлю резко поднимают. Суспензия грамотрицательных бактерий становится
вязкой и тянется за петлей, образуя тяжи. Грамположительные бактерии
равномерно распределяются в капле щелочи. Реакция считается отрицательной,
если образования слизистых тяжей не наблюдается в течение 60 с. Образование
вязкой суспензии клеток грамотрицательных бактерий в щелочи связано с
лизисом клеточных стенок       и освобождением ДНК. Метод используют в
качестве    предварительного   для    диагностики.    Существуют      исключения,
например грамотрицательные флавобактерии не образуют в щелочи слизистых
тяжей.
     "Негативная окраска" — окраска капсул жидкой тушью — заключается в
том, что клетки бактерий помещают сначала в каплю разбавленного
наполовину водой карболового фуксина Циля, а затем через 2—3 мин их
смешивают с каплей туши и размазывают по предметному стеклу краем
покровного стекла. После подсушивания препарат рассматривают под
микроскопом. Бесцветные капсулы резко выступают между темным фоном пре-
парата и окрашенными в красный цвет клетками бактерий.
     Морфологию клеток         исследуют в       электронном микроскопе (см.
Приложение).
                                Актиномицеты

     Методы выявления и количественного учета актиномицетов. Для
выявления      и    количественного      учета       стрептомицетов      (наиболее
распространенных в почвах представителей актиномицетов, принадлежащих к
роду Streptomyces) чаще всего используют метод посева почвенной суспензии
на плотные среды — крахмало-аммиачную, крахмало-казеиновую, казеин-
глицериновую, среду с хитином и др. (Звягинцев, Зенова, 2001).
     Для наиболее полного выделения актиномицетов из почвы производят
механическую       обработку    образцов     с    целью      десорбции     клеток
микроорганизмов: растирание почвы, обработку ультразвуком на установке
УЗДН-1 (22 кГц, 0,44 А, в течение 2 мин; Звягинцев, 1987).
     В качестве селектирующих агентов при выделении стрептомицетов из
                                        42