Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 44 стр.

почвы используют ингибиторы, подавляющие рост других микроорганизмов
(немицелиальных бактерий и грибов) — антибиотики (пенициллин — 1 мг/л,
стрептомицин — 25, полимиксин — 5, нистатин — 50, циклогексимид — 50,
мипарицин — 50 мг/л; налидиксовую кислоту (1-10 мкг/мл), фенол и другие
химические вещества; обогащают почву           СаСОз, хитином, кератином;
используют высушивание и прогревание (40°—45°; 2—16 ч) образцов перед
анализом.
     Выявление и учет представителей других, так называемых "редких"
(редко встречающихся) родов актиномицетов возможны при использовании
специфических селективных приемов (Зенова, 2000): прогревание образцов
перед посевом (100-1200 , 1 ч), использование селективных сред с добавлением
различных антибиотиков, длительные сроки инкубации (до 3-6 недель).
     Дифференцированно учитывать споры и мицелий в видовой
популяции актиномицетов в почве позволяет следующий метод, который
предусматривает удаление почвенных частичек, мешающих выявлению спор, и
концентрирование мицелия и спор, что обеспечивает учет популяции в
диапазоне естественных (низких) уровней обилия: 1 г почвы вносят в колбу,
доливают 100 мл воды, добавляют 1—2 капли поверхностно-активного
вещества    Твин-60   для     более   полной   десорбции   микроорганизмов,
обрабатывают суспензию на ультразвуковом дезинтеграторе УЗДН-1 (22 кГц,
0,44 А, 2 мин), добавляют смесь коагулянтов Са(ОН)2 и MgCO3 (навеска 0,7 г, в
отношении 2:5) для удаления почвенных частиц и коллоидов. После
двухминутного взбалтывания суспензию отстаивают в мерном цилиндре на
100 мл 5 мин, отбирают из надосадочной жидкости пробу в 1 мл и фильтруют
ее через мембранный фильтр (диаметр пор 0,23 мкм), который предварительно
выдерживают для тушения собственной люминесценции в насыщенном
спиртовом растворе судана черного В. После фильтрации фильтры окрашивают
по двухэтажной схеме непрямого метода флуоресцирующих антител (Методы
почвенной микробиологии и биохимии, 1991), высушивают и микроскопируют
(Люмам И-3, 90х). Споры и мицелий актиномицетов имеют яркое желто-зеле-
ное свечение (Кожевин,1989)

                                      43