Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 57 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

МГУ | Москва

Составители: 

Рубрика: 

56
которых происходит их развитие, и не распределяются равномерно в воде при
приготовлении разведений.
Для микроскопирования берут разрушающуюся бумагу, помещают ее на
предметное стекло в каплю воды, разрывают волокна бумаги препаровальными
иглами, распределяют на стекле, фиксируют, окрашивают и наблюдают
микроорганизмы.
Образование метана. Минеральный состав среды (г): NH
4
C1 - 0,75;
КН
2
РО
4
- 1,0; К
2
НРО
4
- 2,0; MgCl
2
.
6H
2
0 - 0,02; CoCl
2
.
бН
2
О - 0.0!; NaНСОз -
2,0; СаСОз - 2,0; выщелоченный агар - 12; вода водопроводная - 100 мл, вода
дистиллированная - 900 мл.
Сульфаты в среду не вводят, чтобы препятствовать развитию
сульфатредуцирующих бактерий. В среду перед посевом добавляют 1 - 2 мл/л
дрожжевого экстракта и 20 мл/л простерилизованной культуральной жидкости,
полученной при развитии накопительной культуры метаносарцины. Для
снижения окислительно-восстановительного потенциала среду кипятят,
продувают углекислотой и вносят 4 мл/л 3%-ного раствора Na
2
S
.
9H
2
O в 0,5%-
ном растворе Na
2
CO
3
, что соответствует 17 мг/л H
2
S, pH 7, гН
2
около 12. Перед
посевом в расплавленную среду вносят источники энергии — кальциевые соли
муравьиной, уксусной, молочной кислот или спирты (этанол, метанол) в
количестве 1%.
Существует метод выделения метанобразующих бактерий, в котором в
качестве источника энергии используется молекулярный водород. Для засева
берут разведения почвенной суспензии в стерильной воде, содержащей 10—20
мл/л Н
2
; 1 мл посевного материала вносят в стерильную пробирку, затем
заливают приготовленную среду так, чтобы не оставалось пузырьков воздуха.
Время инкубации при 28—30° составляет от 10 дней до нескольких месяцев. О
развитии метанобразующих бактерий судят по выделению пузырьков газа.
Однако газообразование не может служить единственным критерием развития
метанобразующих бактерий. Для подтверждения присутствия бактерий,
образующих метан, необходим еще и газовый анализ. Количественный учет
метанобразующих бактерий может быть проведен с помощью метода 
которых происходит их развитие, и не распределяются равномерно в воде при
приготовлении разведений.
     Для микроскопирования берут разрушающуюся бумагу, помещают ее на
предметное стекло в каплю воды, разрывают волокна бумаги препаровальными
иглами, распределяют на стекле, фиксируют, окрашивают и наблюдают
микроорганизмы.
     Образование метана. Минеральный состав среды (г): NH4C1 - 0,75;
КН2РО4 - 1,0; К2НРО4 - 2,0; MgCl2 . 6H20 - 0,02; CoCl2 . бН2О - 0.0!; NaНСОз -
2,0; СаСОз - 2,0; выщелоченный агар - 12; вода водопроводная - 100 мл, вода
дистиллированная - 900 мл.
     Сульфаты     в   среду   не   вводят,   чтобы   препятствовать   развитию
сульфатредуцирующих бактерий. В среду перед посевом добавляют 1 - 2 мл/л
дрожжевого экстракта и 20 мл/л простерилизованной культуральной жидкости,
полученной при развитии накопительной культуры метаносарцины. Для
снижения    окислительно-восстановительного      потенциала   среду   кипятят,
продувают углекислотой и вносят 4 мл/л 3%-ного раствора Na2S . 9H2O в 0,5%-
ном растворе Na2CO3, что соответствует 17 мг/л H2S, pH 7, гН2 около 12. Перед
посевом в расплавленную среду вносят источники энергии — кальциевые соли
муравьиной, уксусной, молочной кислот или спирты (этанол, метанол) в
количестве 1%.
     Существует метод выделения метанобразующих бактерий, в котором в
качестве источника энергии используется молекулярный водород. Для засева
берут разведения почвенной суспензии в стерильной воде, содержащей 10—20
мл/л Н2; 1 мл посевного материала вносят в стерильную пробирку, затем
заливают приготовленную среду так, чтобы не оставалось пузырьков воздуха.
Время инкубации при 28—30° составляет от 10 дней до нескольких месяцев. О
развитии метанобразующих бактерий судят по выделению пузырьков газа.
Однако газообразование не может служить единственным критерием развития
метанобразующих бактерий. Для подтверждения присутствия бактерий,
образующих метан, необходим еще и газовый анализ. Количественный учет
метанобразующих бактерий может быть проведен с помощью метода
                                       56

Страницы