Теоретические основы пищевой биотехнологии. Зюзина О.В - 17 стр.

UptoLike

Рубрика: 

,
1000
cp
hS
N
x
=
где N
ср
среднее число дрожжей в квадрате, шт; hглубина камеры; Sплощадь квадрата сетки, мм (площадь
большого квадрата 1/25 мм
2
, малого – 1/400 мм
2
).
9. Результаты подсчеты дрожжевых клеток
Количество клеток в одном
квадрате сетки, шт.
Час
роста
1 2 3 4 5
Среднее число
клеток, шт
Количество
клеток в 1 мл
Одновременно зафиксировать в табл. 10 значения рН среды и температуры по показаниям шкалы ионо-
метра.
7. В каждой пробе, начиная с исходного момента культивирования, определить содержание сахара в сре-
де, как основного углеродосодержащего субстрата, для этого рекомендуется использовать йодометрический
метод определения сахара в биологических объектах, а также замеряют количество усвояемого (растворенного)
азота.
Количество усвояемого азота определяют формальным титрованием. 10 мл бражки разбавляют 90 мл
дистиллированной воды и титруют 0,1 н раствором гидроксида натрия с фенолфталеином до слабо-розового
окрашивания. Затем туда же приливают 5 мл нейтрального 40 %-ного формалина и титруют вторично тем же
раствором NaOH опять до слабо-розового окрашивания.
Число миллилитров 0,1 н раствора NaOH, пошедшее на вторичное титрование, характеризует формальное
число испытуемой жидкости. Эта величина относительная и показывает количество растворенного в среде ам-
монийного и аминного азота.
Запись в лабораторном журнале
Объем реакционной смеси на титрование, мл .............................
Количество 0,1 н раствора NaOH на первое титрование, мл .....
Количество 0,1 н раствора NaOH на второе титрование, мл .....
Основой йодометрического метода является способность редуцирующих сахаров (глюкозы и мальтозы)
окисляться йодом до соответствующих кислот. Определению предшествует холостой опыт, в котором опреде-
ляется соотношение между приготовленными 0,1 н растворами йода (25,0 см
3
) и тиосульфата натрия. Его про-
водят, как указано ниже, только вместо 10 см
3
разбавленного основного раствора в коническую колбу отмери-
вают 10 см
3
дистиллированной воды.
Основной раствор содержащий сахарозу разбавляют в 10 раз. Для этого в мерную колбу вместимостью
100 см
3
отмеривают пипеткой 10 см
3
основного раствора, объем раствора доводят дистиллированной водой до
метки и тщательно перемешивают.
10 см
3
полученного раствора пипеткой переносят в коническую колбу вместимостью 250 – 400 см
3
, ту-
да же отмеривают пипеткой 25,0 см
3
0,1 н раствора йода и медленно приливают из бюретки 30,0 см
3
0,1 н рас-
твора гидроксида натрия. Содержимое колбы тщательно перемешивают, накрывают колбу часовым стеклом
или закрывают пробкой и ставят в темное место на 15 – 20 мин. Затем вносят 4,5 – 5 см
3
1 н раствора серной
кислоты и титруют 0,1 н раствором тиосульфата натрия до светло-желтого окрашивания, в конце добавляют 1
см
3
раствора крахмала и продолжают титрование до обесцвечивания.
Массовая доля редуцирующих веществ в пересчете на сухое вещество (%) определяют по формуле
(
)
с
KVV
P
200
1001009
0
в
=
,
где V
0
объем 0,1н раствора тиосульфата натрия, израсходанного на титрование 25 см
3
0,1 н раствора йода в
холостом опыте, см
3
; Vобъем 0,1н раствора тиосульфата натрия, израсходанного на титрование при анализе,
см
3
; 9 – масса глюкозы, соответствующая 1 см
3
0,1н раствора тиосульфата натрия, мг; Кпоправочный коэф-
фициент к нормальности раствора тиосульфата натрия; 200 – масса сахарозы, содержащаяся в 10 см
3
разбав-
ленного основного раствора, мг; смассовая доля сухих веществ сахарозы, %.
Запись в лабораторном журнале
Объем тиосульфата в холостом опыте V
0
, мл ...................................
Объем тиосульфата при анализе бражки, V
1
, мл ...............................
Доля редуцирующих веществ в пересчете на сухое вещество, %,
По ходу лабораторной работы заносить данные в табл. 10.
Составить протокол работы согласно форме.
Форма отчета по лабораторной работе 4
1. Название и цель лабораторной работы.
2. Схема лабораторной остановки с кратким описанием принципа ее работы.
3. Краткое описание используемых в работе методов анализа концентрации биомассы дрожжей, углерод-