Биохимия. Березовская В.А. - 22 стр.

UptoLike

Составители: 

границу фронта растворителя. После этого бумагу сразу
же помещают в сушильный шкаф при температуре 70–80ºС на
8–10 мин для удаления растворителя и фиксации аминокислот.
Внимание! Достав бумагу из камеры, ее нужно как можно
быстрее поместить в сушильный шкаф, так как ее подсушивание
при комнатной температуре может привести к неправильным ре-
зультатам.
4.4. «Проявление» хроматограммы.
В ванночку наливают раствор нингидрина. Высушенную бу-
магу быстро окунают в него, кладут на грани сухой крышки (или
донышка) чашки Петри и сразу же (немедленно!) помещают на
5–6 мин в сушильный шкаф при температуре 90–100 °С. После
высушивания на диске появляется кольцо соответствующей ами-
нокислоты.
4.5. Определение коэффициентов распределения (R
f
) индиви-
дуальных аминокислот.
При помощи линейки измеряют расстояние, которое прошла
каждая из аминокислот от места старта (места нанесения амино-
кислоты) до фронта пятна, и расстояние, которое прошел раство-
ритель. После этого по формуле (1) вычисляют значение коэффи-
циента распределения (R
f
) для каждой аминокислот.
4.6. Проведение хроматографического разделения аминокис-
лот в контрольном растворе.
Хроматографическое разделение аминокислот в контрольном
растворе проводят аналогично пп. 4.1–4.4. Определяют коэффи-
циенты распределения для всех проявившихся на хроматограмме
аминокислот (аналогично п. 4.5). Сравнивают полученные значе-
ния R
f
со значениями коэффициентов распределения индивиду-
альных аминокислот и определяют, какие аминокислоты находи-
лись в исследуемом растворе.
4.7. Делают выводы о разделении и определении аминокис-
лот методом круговой хроматографии на бумаге.
5. СОДЕРЖАНИЕ ОТЧЕТА
Отчет составляется с указанием цели, задания, принципа
хроматографического метода, включает экспериментальную
часть и выводы. В экспериментальной части отражаются этапы
22
границу фронта растворителя. После этого бумагу сразу
же помещают в сушильный шкаф при температуре 70–80ºС на
8–10 мин для удаления растворителя и фиксации аминокислот.
    Внимание! Достав бумагу из камеры, ее нужно как можно
быстрее поместить в сушильный шкаф, так как ее подсушивание
при комнатной температуре может привести к неправильным ре-
зультатам.
    4.4. «Проявление» хроматограммы.
    В ванночку наливают раствор нингидрина. Высушенную бу-
магу быстро окунают в него, кладут на грани сухой крышки (или
донышка) чашки Петри и сразу же (немедленно!) помещают на
5–6 мин в сушильный шкаф при температуре 90–100 °С. После
высушивания на диске появляется кольцо соответствующей ами-
нокислоты.
    4.5. Определение коэффициентов распределения (Rf ) индиви-
дуальных аминокислот.
    При помощи линейки измеряют расстояние, которое прошла
каждая из аминокислот от места старта (места нанесения амино-
кислоты) до фронта пятна, и расстояние, которое прошел раство-
ритель. После этого по формуле (1) вычисляют значение коэффи-
циента распределения (Rf) для каждой аминокислот.
    4.6. Проведение хроматографического разделения аминокис-
лот в контрольном растворе.
    Хроматографическое разделение аминокислот в контрольном
растворе проводят аналогично пп. 4.1–4.4. Определяют коэффи-
циенты распределения для всех проявившихся на хроматограмме
аминокислот (аналогично п. 4.5). Сравнивают полученные значе-
ния Rf со значениями коэффициентов распределения индивиду-
альных аминокислот и определяют, какие аминокислоты находи-
лись в исследуемом растворе.
    4.7. Делают выводы о разделении и определении аминокис-
лот методом круговой хроматографии на бумаге.

                 5. СОДЕРЖАНИЕ ОТЧЕТА
    Отчет составляется с указанием цели, задания, принципа
хроматографического метода, включает экспериментальную
часть и выводы. В экспериментальной части отражаются этапы
                             22