Биохимия. Березовская В.А. - 27 стр.

0,4%-ного раствора гидроксида натрия (NaOH). Полученную
массу растирают не менее 15 мин, после чего суспензию фильт-
руют через бумажный фильтр или центрифугируют. Получен-
ный осадок выбрасывают, а весь фильтрат (центрифугат) соби-
рают, помещают в стакан и понемногу прибавляют 10%-ный
раствор уксусной кислоты (около 5–6 мл). После каждого при-
бавления лакмусовой бумажкой проверяют реакцию среды. Ки-
слоту добавляют до тех пор, пока среда не станет слабокислой.
В этих условиях нуклеопротеиды выпадают в осадок. Получен-
ную суспензию центрифугируют, фильтрат сливают и отделяют
осадок нуклеопротеидов.
    4.2. Гидролиз нуклеопротеидов.
    Полученный осадок нуклеопротеидов переносят в колбу для
гидролиза и добавляют туда 20 мл 10%-ной серной кислоты.
Колбу закрывают пробкой, к которой подсоединен обратный воз-
душный холодильник, и нагревают (слабо кипятят) на водяной
кипящей бане (или на сетке) в течение 1 часа. После этого гидро-
лизат отфильтровывают и проводят с ним качественные реакции
на наличие продуктов гидролиза.
    4.3. Определение белков и пептидов.
    При проведении гидролиза при условиях, указанных в п. 4.2,
белки подвергаются ему лишь частично и расщепляются только
до пептидов. Белки и пептиды в гидролизате обнаруживают с по-
мощью биуретовой реакции. Для этого берут пробирку и вносят в
нее 10 капель полученного раствора гидролизата, прибавляют
10 капель 10%-ного раствора NaOH и 2 капли 1%-ного раствора
сульфата меди (CuSO4). Все тщательно перемешивают, наблюда-
ют за изменением цвета (появляется розовая или розово-
фиолетовая окраска) и делают выводы.
    4.4. Открытие пуриновых оснований.
    В пробирку наливают 10 капель гидролизата и осторожно,
по каплям, добавляют концентрированный раствор аммиака до
щелочной реакции по лакмусу, а затем вносят 8–10 капель амми-
ачного раствора нитрата серебра. Через несколько минут выпада-
ет хлопьевидный светло-коричневый осадок солей пуриновых
оснований.


                              27