Медицинская биохимия. Бескровная Е.В - 13 стр.

щества имеют в своем составе ассиметрические атомы углерода и            2. Определение энергии активации.
являются оптически активными. По мepe течения реакции правое
                                                                          Энергию активации определяют также графически. Строят
вращение поляризации водного раствора сахарозы будет сменяться
                                                                    зависимость вида lg K = lg K(1/T). Затем находят угол наклона дан-
левым, поскольку суммарное вращение эквимолярной смеси глю-
                                                                    ной прямой ξ.
козы и фруктозы имеет знак «–» и соответствует левому вращению.
                                                                          Энергия активации E выражается следующим образом:
Получение экспериментальной зависимости уменьшения угла вра-
щения плоскости поляризации реакционной смесью (пропорцио-                                    E = 2,3 R tgξ,
нальное уменьшению концентрации сахарозы в растворе) от време-      где R=8,31 Дж/(К·моль) – универсальная газовая постоянная.
ни реакции достаточно для расчета всех кинетических параметров
данной реакции.                                                          Методика измерений
      1. Определение константы скорости реакции.
                                                                         Для приготовления 30 %-го раствора сахарозы необходимо в
     а) Интегральный метод.                                         мерной колбе на 100 мл растворить навеску сахарозы массой 30
     В этом методе константа скорости реакции К вычисляется         граммов в 75 мл дистиллированной воды. В качестве катализатора
следующим способом:                                                 использовать стандарт-титр соляной кислоты, который готовят сле-
                           n
                                 2,3 б 0 − б ∞                      дующим образом: в мерный цилиндр вставляют воронку диаметром
                          ∑       ti
                                     lg
                                        б ti − б ∞
                                                                    9–10 см. В торце ампулы стандарт-титра пробивают отверстие с
                          i =1                                      помощью стеклянного бойка. Перевернув ампулу, содержимое пе-
                     K=                              ,
                                      n                             реносят в колбу через воронку. Затем ампулу тщательно промыва-
                                                                    ют изнутри дистиллированной водой в количестве шестикратного
где n – число измерений при одной температуре; α0 – угол враще-
                                                                    объема ампулы. Объем жидкости доводят до 250 мл и тщательно
ния реакционной смеси в нулевой момент времени реакции, прак-
                                                                    перемешивают. После этого по 20 мл приготовленных растворов с
тически не зависящий от температуры, который определяется из
                                                                    помощью пипетки вносят в колбы.
                     б
соотношения б t =0 = (так как в реакционной смеси раствор раз-           Термостатирование растворов проводят в термостате WB-1.
                     2                                                   Измерение углов вращения плоскости поляризации произво-
бавлен точно вдвое, α – угол вращения исходного раствора сахаро-    дят на поляриметре СМ-3 в поляриметрической трубке длиной 2
зы); α∞=–6,50 – угол вращения реакционной смеси при полном гид-     дм. Устройство поляриметра позволяет вести реакцию гидролиза
ролизе сахарозы.                                                    непосредственно в кюветной камере поляриметра.
      б) Графический способ.
      Для определения константы скорости реакции К необходимо            Порядок выполнения работы
                                   б − б∞
построить зависимость величины lg 0        от времени. После это-        1. Ознакомиться с устройством и принципом измерений по-
                                   бt − б∞                          ляриметра СМ-3.
го следует определить β – угол наклона прямой к оси абсцисс.             2. Приготовить 30 %-й раствор сахарозы и катализатор.
Константа скорости реакции выражается через β:                           3. С помощью поляриметра определить угол вращения плос-
                                                                    кости поляризации исходным раствором сахарозы и рассчитать
                           К = 2,3 tgβ.
                                                                    точную концентрацию сахарозы в растворе по формуле

                                    25                                                             26