Медицинская биохимия. Бескровная Е.В - 29 стр.

                                                                  ных кровяных клетках – эритроцитах. По химической природе ге-
               Лабораторная работа №8                             моглобин – сложный белок – хромопротеид, состоящий из белка
                                                                  глобина и железопорфирина – гема. Глобин состоит из четырех
   Определение содержания гликозилированного                      субъединиц: двух α и двух β – и соответственно содержит четыре
     гемоглобина методом микроколоночной                          полипептидные цепочки двух видов. Каждая α-цепочка содержит
                                                                  141, а β-цепочка – 146 аминокислотных остатков. Таким образом,
                 хроматографии                                    вся молекула включает 573 аминокислоты. Каждая субъединица
                                                                  гемоглобина содержит одну небелковую группу – гем. Гем пред-
     Цель работы: оценка уровня гликемии по содержанию гли-
                                                                  ставляет собой комплекс Fe(II) с протопорфирином. Поскольку од-
козилированного гемоглобина в крови.
                                                                  на молекула гемоглобина содержит четыре субъединицы и, следо-
                                                                  вательно четыре гема, каждый из которых может обратимо присое-
      Приборы, принадлежности и реактивы: автоматический
                                                                  динять одну молекулу кислорода, реакцию оксигенации можно
спектрофотометр СФ-56, кварцевые кюветы с длиной оптического
                                                                  разделить на четыре стадии. Без кислорода молекулы гемоглобина
пути 1 см, хроматографическая микроколонка, дозирующие дис-
                                                                  обладают низким сродством к кислороду, однако при достаточно
пенсеры Biohit Proline, термостат WB-1, колбы мерные объемом
                                                                  высоком парциальном давлении последнего происходит соедине-
500 и 1000 мл, пробирки стеклянные и пластиковые, штатив для
                                                                  ние одного гема с одной молекулой кислорода, что влияет на при-
пробирок, буферные растворы № 1 и 2, растворы № 1 и 2, венозная
                                                                  соединение кислорода к другому гему и меняет кислотно-основные
кровь, дистиллированная вода.
                                                                  свойства гемоглобина. Поэтому в тканях, где значительная часть
                                                                  гемоглобина теряет кислород и становится более сильным основа-
     Гемоглобин, его свойства и функции. Гликозилирован-
                                                                  нием, гемоглобин связывает образующуюся в ходе метаболических
ный гемоглобин
                                                                  внутриклеточных процессов углекислоту. В альвеолах легких де-
                                            Гемоглобин (Hb) –     зоксигемоглобин снова превращается в оксигемоглобин, становится
                                      красный железосодержа-      более сильной кислотой и способствует отщеплению CO2.
                                      щий пигмент крови чело-           Установлено, что в крови человека наряду с основной фрак-
                                      века, позвоночных и неко-   цией гемоглобина (HbA) содержится незначительное количество
                                      торых     беспозвоночных    других фракций, названных «минорными»: HbA1а (образован фрук-
                                      животных; в организме       тозой), HbA1b (образован глюкозой-6-фосфатом), HbA1c (образуется
                                      выполняет функцию пере-     при участии глюкозы). У здоровых взрослых людей на долю HbA
                                      носа кислорода (O2) из      приходится 90%, НbА1a – 1,6%; НbА1b – 0,8%, HbA1c – 3,6%; НbА2 –
                                      органов дыхания к тканям;   2,5% и НbF – 0,5%. Гликозилированный гемоглобин – это гемогло-
                                      играет также важную роль    бин, в котором молекула глюкозы конденсируется с β-концевым ва-
                                      в переносе углекислого      лином β-цепи молекулы НbА. Этот неферментативный процесс про-
                                      газа от тканей в органы     текает медленно, в течение всей жизни красных кровяных телец
                                      дыхания. Объемная фор-      (около 120 дней). Установлено, что гликозилирование осуществля-
                                      мула гемоглобина пред-      ется через стадию образования альдимина, сравнительно неустойчи-
     Рис. 1. Объемная формула         ставлена на рис. 1. Гемо-   вого соединения. Далее альдимин посредством химического преоб-
             гемоглобина              глобин находится в крас-
                                57                                                              58