Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В. - 17 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

выявил в нем характерные для триптофана максимумы.
Кроме того, спектр поглощения в указанном диапазоне длин
волн позволяет идентифицировать в пиках такие
аминокислоты, как фенилаланин и тирозин.
2.7. Газовая хроматография
Газовая хроматографияметод разделения летучих
веществ: газов (при нормальной температуре) или паров (при
повышенной температуре).
В качестве неподвижной фазы в газовой хроматографии
применяют твердые материалы (насадочные или набивные
колонки), твердые материалы, покрытые слоем жидкости, или
капилляры с нанесенным на внутреннюю поверхность слоем
жидкости (капиллярные колонки). В зависимости от состояния
фаз различают газотвердофазную или газоадсорбционную
хроматографию и газожидкостную или распределительную
хроматографию.
В качестве подвижной фазы используют газ-носитель,
переносящий разделяемые вещества через колонку.
Разделение анализируемой смеси происходит за счет различного
времени удерживания веществ в неподвижной фазе.
Газ и парообразные вещества в качестве подвижной фазы
имеют ряд преимуществ по сравнению с жидкостью:
относительно малая вязкость газов и паров позволяет
использовать колонки большей длины, чем в жидкостной
хроматографии, что дает очень высокую эффективность
разделения. Можно разделить достаточно сложные смеси,
содержащие большое количество соединений одного класса
(нефть, природный газ, природные жиры);
сильное различие свойств газов или паров (элюентов) и
разделяемых соединений породило разнообразные методы
детекции веществ, выходящих из колонки.
ввиду специфичности и высокой чувствительности метода
возможно определение компонентов в пробе с концентрацией
порядка 1—10 пг (10
-12
— 10
-11
г).
Газожидкостная хроматография дала возможность
разделять смеси исключительно близких по свойствам веществ
(изомеров, изотопно-замещенных соединений и др.).
Современная газожидкостная хроматография применяется
для анализа и разделения очень широкого круга веществот
легких газов до высокомолекулярных компонентов нефти,
топлива, триглицеридов жирных кислот, летучих производных
многих металлов, а также с применением определенной
пробоподготовки веществ, в обычных условиях нелетучих.
В качестве элюента для газовых хроматографов
используют сжатый газ из баллонов или генераторов газов
(водорода, азота). Аналитическую колонку помещают в
термостат с заданной температурной программой. Анализы
проводят при температурах как ниже нуля при наличии
соответствующего криогенного аппаратурного оформления, так и
при температурах 350—400 "С и выше. Анализы наркотических и
лекарственных веществ проводят при температуре от 100 до
250—300 "С.
Газохроматографические колонки, применяемые в
газожидкостной хроматографии, могут быть как набивными,
так и капиллярными.
-набивные колонки представляют собой металлические
или стеклянные трубки длиной 0,2—5 м. Эти трубки заполнены
инертными порошкообразными твердыми носителями с зернами
0,1—0,5 мм, на которые нанесены неподвижные жидкие фазы от
0,1 до 15—20% массы носителя.
-капиллярные колонки представляют собой трубки длиной
до 100 м и диаметром 0,1—0,5 мм, изготовленные из металлов,
стекла, а в последние годы преимущественно из плавленого
кварца. Внутренняя поверхность капилляров покрыта тонкой
выявил в нем характерные для триптофана максимумы.                —ввиду специфичности и высокой чувствительности метода
Кроме того, спектр поглощения в указанном диапазоне длин       возможно определение компонентов в пробе с концентрацией
волн позволяет идентифицировать в пиках такие                  порядка 1—10 пг (10 -12 — 10 -11 г).
аминокислоты, как фенилаланин и тирозин.
                                                                   Газожидкостная     хроматография    дала    возможность
                                                                разделять смеси исключительно близких по свойствам веществ
                2.7. Газовая хроматография                      (изомеров, изотопно-замещенных соединений и др.).
    Газовая хроматография — метод разделения летучих            Современная газожидкостная хроматография применяется
веществ: газов (при нормальной температуре) или паров (при      для анализа и разделения очень широкого круга веществ — от
повышенной температуре).                                        легких газов до высокомолекулярных компонентов нефти,
                                                                топлива, триглицеридов жирных кислот, летучих производных
    В качестве неподвижной фазы в газовой хроматографии         многих металлов, а также с применением определенной
применяют твердые материалы (насадочные или набивные            пробоподготовки веществ, в обычных условиях нелетучих.
колонки), твердые материалы, покрытые слоем жидкости, или            В качестве элюента для газовых хроматографов
капилляры с нанесенным на внутреннюю поверхность слоем         используют сжатый газ из баллонов или генераторов газов
жидкости (капиллярные колонки). В зависимости от состояния     (водорода, азота). Аналитическую колонку помещают в
фаз различают газотвердофазную или газоадсорбционную           термостат с заданной температурной программой. Анализы
хроматографию и газожидкостную или распределительную           проводят при температурах как ниже нуля при наличии
хроматографию.                                                 соответствующего криогенного аппаратурного оформления, так и
     В качестве подвижной фазы используют газ-носитель,        при температурах 350—400 "С и выше. Анализы наркотических и
переносящий разделяемые вещества через колонку.                лекарственных веществ проводят при температуре от 100 до
Разделение анализируемой смеси происходит за счет различного   250—300 "С.
времени удерживания веществ в неподвижной фазе.                      Газохроматографические колонки, применяемые в
     Газ и парообразные вещества в качестве подвижной фазы     газожидкостной хроматографии, могут быть как набивными,
имеют ряд преимуществ по сравнению с жидкостью:                так и капиллярными.
     —относительно малая вязкость газов и паров позволяет            -набивные колонки представляют собой металлические
использовать колонки большей длины, чем в жидкостной           или стеклянные трубки длиной 0,2—5 м. Эти трубки заполнены
хроматографии, что дает очень высокую эффективность            инертными порошкообразными твердыми носителями с зернами
разделения. Можно разделить достаточно сложные смеси,          0,1—0,5 мм, на которые нанесены неподвижные жидкие фазы от
содержащие большое количество соединений одного класса         0,1 до 15—20% массы носителя.
(нефть, природный газ, природные жиры);                              -капиллярные колонки представляют собой трубки длиной
   —сильное различие свойств газов или паров (элюентов) и      до 100 м и диаметром 0,1—0,5 мм, изготовленные из металлов,
разделяемых соединений породило разнообразные методы           стекла, а в последние годы преимущественно из плавленого
детекции веществ, выходящих из колонки.                        кварца. Внутренняя поверхность капилляров покрыта тонкой