Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В. - 5 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

данными, приведенными в табл. 3, можно выбрать принцип
разделения.
Анализируемые вещества распределены по полярности
функциональных групп (возрастает слева направо). Неполярные
вещества разделяют при помощи нормально-фазовой
хроматографии.
Таблица 2. ВЫБОР ПРИНЦИПА РАЗДЕЛЕНИЯ И ТИПА
СОРБЕНТА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАСТВОРИМОСТИ
ЦЕЛЕВОГО ВЕЩЕСТВА
Растворимость
целевого
Принцип Сорбент
веществ
а
р
азделени
я
х
р
оматог
р
а
ф
ия х
р
оматог
р
а
ф
ия
низкого давления высокого
давления
Только в воде Ионообмен Дауэкс, сефадекс, Ионообменники
ионообменная на основе
целлюлоза
силикагеля
Гель
-
Се
ф
а
д
екс G
По
р
истое стекло
х
р
оматог
р
а
ф
и
я
биогель
,
ги
др
огель
,
(
CPG
),
TS
K
-гель
сефакрил, агароза
В вод
е
Расп
р
еделени
е
Ц
еллюлоза или Силикагель
и этаноле модифицированный
декст
р
ан
(
се
ф
адекс
LH),
элюент: малопо
-
ля
р
ный + сильнопо-
лярный
растворитель
Гель
-
Се
ф
а
д
екс L
H
По
р
агель
,
хроматография пористое стекло
В этаноле Адсорбция Силикагель, Модифицирован
и дихло
р
метан
е
или се
ф
адекс L
H
кизельгель
(хлористом
распределение
-
NO
2
,
-
CM
)
метилене
)
Гель
-
Се
ф
адекс L
H
Полисти
р
агель
хроматография (например,
стирагель)
В дихлорметане Адсорбция Силикагель, Силикагель
и гептане
или гель
-
оксид алюминия
х
р
оматог
р
а
ф
и
я
Полисти
р
агель Полисти
р
агель
(например, био-
бедс)
(например,
стирагель)
Таблица 3. ПРИНЦИП РАЗДЕЛЕНИЯ ДЛЯ
КСЕНОБИОТИКОВ РАЗНЫХ ХИМИЧЕСКИХ КЛАССОВ
Неполярные
соединения
Полярные соединения
Углеводороды и
их производные
Кислородсодержа
щие соединения
Доноры
протонов (ОН-
и NH-кислоты)
Ионогенные
соединения
RH RX RNO
2
О О О О
II II II II
ROR RC-OR RCR RCH RCNHR
RNH
2
ROH
ArOH RCO
2
H
+
NH
3
-R-CO
2
-
Нормально-
фазовая
хроматография
Обращенно-
фазовая
хроматография
Распредели-
тельная
хроматография
Ионообмен-
ная хромато-
графия
Выбор системы элюентов определяется рядом факторов. В
гель-хроматографии вещества должны хорошо растворяться в
элюенте, а вязкость элюента и раствора пробы должна быть
минимальной. Селективность ионообменной хроматографии
зависит не только от ионной силы буфера, но и от природы
противоионов буфера. В адсорбционной хроматографии в
большинстве случаев подходят системы метанол—вода или
ацетонитрил—вода. Вторая система предпочтительнее, так как
вязкость элюента по мере возрастания концентрации
ацетонитрила убывает. Сопротивление колонки для системы
метанол—вода выше, чем для системы ацетонитрил—вода. 
данными, приведенными в табл. 3, можно выбрать принцип                   В дихлорметане      Адсорбция         Силикагель,       Силикагель
разделения.                                                              и гептане           или гель-       оксид алюминия
   Анализируемые вещества распределены по полярности                                       хроматография      Полистирагель     Полистирагель
                                                                                                             (например, био-     (например,
функциональных групп (возрастает слева направо). Неполярные                                                       бедс)          стирагель)
вещества разделяют при помощи нормально-фазовой
хроматографии.
Таблица 2. ВЫБОР ПРИНЦИПА РАЗДЕЛЕНИЯ И ТИПА                              Таблица 3. ПРИНЦИП РАЗДЕЛЕНИЯ ДЛЯ
СОРБЕНТА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАСТВОРИМОСТИ                                  КСЕНОБИОТИКОВ РАЗНЫХ ХИМИЧЕСКИХ КЛАССОВ
ЦЕЛЕВОГО ВЕЩЕСТВА

                                                                        Неполярные                         Полярные соединения
Растворимость      Принцип                     Сорбент                  соединения
целевого                                                                Углеводороды и      Кислородсодержа           Доноры     Ионогенные
вещества          разделения        хроматография хроматография         их производные      щие соединения         протонов (ОН- соединения
                                  низкого давления       высокого                                                  и NH-кислоты)
                                                                                                                                 +
                                                         давления       RH RX RNO2            О     О О О            RNH2 ROH     NH3-R-CO2-
Только в воде     Ионообмен        Дауэкс, сефадекс, Ионообменники                            II    II  II  II      ArOH RCO2H
                                                                                         ROR RC-OR RCR RCH RCNHR
                                     ионообменная        на основе
                                       целлюлоза        силикагеля
                     Гель-            Сефадекс G,     Пористое стекло
                 хроматография    биогель, гидрогель, (CPG),TSK-гель    Нормально-           Обращенно-             Распредели- Ионообмен-
                                   сефакрил, агароза                    фазовая              фазовая                  тельная    ная хромато-
В воде           Распределение   Целлюлоза или          Силикагель      хроматография        хроматография         хроматография    графия
и этаноле                        модифицированный
                                                                               Выбор системы элюентов определяется рядом факторов. В
                                 декстран (сефадекс
                                                                         гель-хроматографии вещества должны хорошо растворяться в
                                 LH),элюент: малопо-
                                 лярный + сильнопо-                      элюенте, а вязкость элюента и раствора пробы должна быть
                                 лярный                                  минимальной. Селективность ионообменной хроматографии
                                 растворитель                            зависит не только от ионной силы буфера, но и от природы
                     Гель-           Сефадекс LH         Порагель,       противоионов буфера. В адсорбционной хроматографии в
                 хроматография                        пористое стекло    большинстве случаев подходят системы метанол—вода или
В этаноле          Адсорбция          Силикагель,     Модифицирован      ацетонитрил—вода. Вторая система предпочтительнее, так как
и дихлорметане        или             сефадекс LH       кизельгель       вязкость элюента по мере возрастания концентрации
(хлористом       распределение                          -NO2, -CM)       ацетонитрила убывает. Сопротивление колонки для системы
метилене)            Гель-            Сефадекс LH      Полистирагель
                 хроматография                          (например,       метанол—вода выше, чем для системы ацетонитрил—вода.
                                                         стирагель)

Страницы