Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В - 22 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
Полимеразная цепная реакция
1. МЕТОДИКА ОБНАРУЖЕНИЯ
ТРАНСГЕННОЙ ДНК В РАСТЕНИЯХ
И ПРОДУКТАХ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ
Генетически модифицированные (трансгенные)
растения привлекают к себе повышенный интерес не только
как объекты исследования, но и в качестве новых сортов
сельскохозяйственных культур, в том числе пищевой
специализации. Обладая невероятной для природных
организмов устойчивостью к гербицидам или
сопротивляемостью при повреждении насекомыми-
фитофагами, некоторые трансгенные растения, например, соя,
кукуруза, сахарная свекла, томат уже сейчас широко
распространены и в сельском хозяйстве, и на рынке пищевых
продуктов.
Одним из методов, позволяющих определять
генетически модифицированные растения и продукты их
переработки, является полимеразная цепная реакция (ПЦР),
направленная на амплификацию одного или нескольких
фрагментов трансгенной ДНК.
Принцип действия
1. Кчественное определение генно-инженерных вставок в
ДНК растительного происхождения:
• Определение 35S (E35S) промотора
• Определение NOS терминатора
• Определение СР4 - гена (гербицидоустойчивости)
• Определение NPTII -гена (устойчивости к
антибиотикам)
• Определение CryIa - гена (устойчивости к
насекомым)
• Определение CryIIIa - гена (устойчивости к
насекомым)
• Определение генов растительных белков:
ген лектина сои LEC
ген зеина кукурузы ZEX
ген пататина картофеля РАТEX
2. Количественное определение ГМИ в образцах
растительного происхождения при помощи ПЦР
в реальном времени
• выявление процентного отношения ГМ-ДНК
к ДНК растительного компонента:
Определение содержания трансгена
СР4 по отношению к ДНК сои
(линия 40-3-2)
Объекты исследования
Методика обнаружения трансгенной ДНК
предназначена для экспертного обследования
растительного сырья (плодов, семян, клубней и пр.), а
также продуктов их переработки, предназначенных для
употребления в пищу человеком или в качестве корма 
              ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА                                  •  Определение CryIIIa - гена (устойчивости к
             Полимеразная цепная реакция                              насекомым)
                                                                   • Определение генов растительных белков:
            1. МЕТОДИКА ОБНАРУЖЕНИЯ                                      ƒ ген лектина сои LEC
         ТРАНСГЕННОЙ ДНК В РАСТЕНИЯХ                                     ƒ ген зеина кукурузы ZEX
           И ПРОДУКТАХ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ                                    ƒ ген пататина картофеля РАТEX
      Генетически     модифицированные       (трансгенные)   2. Количественное определение ГМИ в образцах
растения привлекают к себе повышенный интерес не только         растительного происхождения при помощи ПЦР
как объекты исследования, но и в качестве новых сортов          в реальном времени
сельскохозяйственных культур, в том числе пищевой                  • выявление процентного отношения ГМ-ДНК
специализации. Обладая невероятной для природных                      к ДНК растительного компонента:
организмов     устойчивостью     к      гербицидам     или               ƒ Определение содержания трансгена
сопротивляемостью     при    повреждении      насекомыми-                   СР4 по отношению к ДНК сои
фитофагами, некоторые трансгенные растения, например, соя,                  (линия 40-3-2)
кукуруза, сахарная свекла, томат уже сейчас широко
распространены и в сельском хозяйстве, и на рынке пищевых
продуктов.
      Одним из методов, позволяющих определять
генетически модифицированные растения и продукты их
переработки, является полимеразная цепная реакция (ПЦР),
направленная на амплификацию одного или нескольких
фрагментов трансгенной ДНК.

                   Принцип действия

1. Кчественное определение генно-инженерных вставок в
   ДНК растительного происхождения:
     • Определение 35S (E35S) промотора
     • Определение NOS терминатора
                                                                           Объекты исследования
     • Определение СР4 - гена (гербицидоустойчивости)
     • Определение NPTII -гена (устойчивости к
                                                                   Методика обнаружения трансгенной ДНК
         антибиотикам)                                       предназначена    для    экспертного    обследования
     • Определение CryIa - гена (устойчивости к
                                                             растительного сырья (плодов, семян, клубней и пр.), а
         насекомым)                                          также продуктов их переработки, предназначенных для
                                                             употребления в пищу человеком или в качестве корма

Страницы