Картирование генома и обратная генетика. Буторина А.К - 17 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВГУ | Воронеж

Составители: 

Рубрика: 

17
достаточно малого количества исходного материала, и в отличие от ПДРФ
не требуется ни клонирования, ни секвенирования. Т.е. техника анализов,
основанных на ПЦР, проще и пригодна для автоматизации, а выявляемый
полиморфизм значительнее.
A. Нормальная и мутантная последовательность аминокислот (кодоны
5,6 и 7) и соответствующие им последовательности нуклеотидов в ДНК
Нормальная
β - цепь
Pro – Glu – Glu
CCT GAG GAG
GGA CTC CTC
Серповидно-
Клеточная
β - цепь
Pro – Val – Glu
CCT GTG GAG
GGA CAC CTC
Сайт рестрикции DdeI
подчеркнут
Б. Локализация DdeI – сайтов на рестрикционной карте участка гена β-
цепи гемоглобина человека: нормального (β) и мутантного (
β
S
)
β
175 201 88 89
β
S
376 88 89
В . Размеры DdeI –рестриктов ДНК из нормальных клеток (ββ) и клеток,
гомозиготных по мутации серповидноклеточной анемии (
ββ
SS
), опреде-
ленные с помощью радиоактивного зонда
ββ
ββ
SS
376
201
175
Рисунок 5. Исследование мутации серповидноклеточной анемии на основе
анализа длины рестрикционных фрагментов ДНК (ПДРФ ) [Айала, 1987]. 
                                  17
достаточно малого количества исходного материала, и в отличие от ПДРФ
не требуется ни клонирования, ни секвенирования. Т.е. техника анализов,
основанных на ПЦР, проще и пригодна для автоматизации, а выявляемый
полиморфизм значительнее.

 A. Нормальная и мутантная последовательность аминокислот (кодоны
 5,6 и 7) и соответствующие им последовательности нуклеотидов в ДНК

          Нормальная    Pro – Glu – Glu
            β-цепь      CCT GAG GAG          Сайт рестрикции DdeI
                        GGA CTC CTC               подчеркнут

          Серповидно-   Pro – Val – Glu
           Клеточная    CCT GTG GAG
            β-цепь      GGA CAC CTC

 Б. Локализация DdeI – сайтов на рестрикционной карте участка гена β-
 цепи гемоглобина человека: нормального (β) и мутантного ( β )
                                                            S


 β                     175                 201             88    89

  β
      S
                                   376                    88     89

 В. Размеры DdeI –рестриктов ДНК из нормальных клеток (ββ) и клеток,
 гомозиготных по мутации серповидноклеточной анемии ( β β ), опреде-
                                                        S S


 ленные с помощью радиоактивного зонда
                              ββ    β β
                                      S S




                                            376




                        201
                        175




Рисунок 5. Исследование мутации серповидноклеточной анемии на основе
 анализа длины рестрикционных фрагментов ДНК (ПДРФ) [Айала, 1987].

Страницы