Картирование генома и обратная генетика. Буторина А.К - 19 стр.

UptoLike

Рубрика: 

19
вует своя температура отжига, значения которой располагаются в интерва-
ле 50 - 65
0
С. Время отжига 20-60 сек.
Рисунок 6. Схема полимеразной цепной реакции [Мюллис , 1990]
3 этап . Синтез ДНК (элонгация). С участием термостабильной ДНК-
полимеразы (Taq-полимераза) происходит избирательный синтез (копиро-
вание) участка ДНК, расположенного между двумя праймерами. Ампли-
фикация происходит в том случае , если расстояние между праймерами на-
ходится в пределах 50-4000 оснований . Синтез ДНК идет от 5 к 3-ему
концу в обоих направлениях , начиная с участков присоединения прайме -
ров. Т.е. наращивание праймеров происходит навстречу друг другу. Мате -
риалом для синтеза новых цепей ДНК служит добавляемая в буферный
раствор смесь четырех дезоксирибонуклеотидтрифосфатов (дНТФ ). Про-
                                  19
вует своя температура отжига, значения которой располагаются в интерва-
ле 50 - 650С. Время отжига 20-60 сек.




     Рисунок 6. Схема полимеразной цепной реакции [Мюллис, 1990]

      3 этап. Синтез ДНК (элонгация). С участием термостабильной ДНК-
полимеразы (Taq-полимераза) происходит избирательный синтез (копиро-
вание) участка ДНК, расположенного между двумя праймерами. Ампли-
фикация происходит в том случае, если расстояние между праймерами на-
ходится в пределах 50-4000 оснований. Синтез ДНК идет от 5’ к 3’-ему
концу в обоих направлениях, начиная с участков присоединения прайме-
ров. Т.е. наращивание праймеров происходит навстречу друг другу. Мате-
риалом для синтеза новых цепей ДНК служит добавляемая в буферный
раствор смесь четырех дезоксирибонуклеотидтрифосфатов (дНТФ). Про-