Картирование генома и обратная генетика. Буторина А.К - 31 стр.

UptoLike

Рубрика: 

31
библиотека геномной ДНК, полученная 1-ой рестриктазой
библиотека геномной ДНК, полученная 2-ой рестриктазой
F
L
M
N
O
P
R
FL L
M
M
N
N
O
O
PP
R
Клоны библиотеки 1 Клоны библиотеки 2
A
B
C
X
Y
Z
Ген F картирован на генетической карте , клонирован и установлена
его нуклеотидная последовательность . Это позволяет идентифицировать в
библиотеке геномной ДНК клоны , соответствующие соседним генам с помо-
щью методики прогулка по хромосоме”.
Клон А (из 1-ой библиотеки ), используемый как зонд при изучении 2-
ой библиотеки , в процессе блоттинга по Саузерну, идентифиципует клон Х за
счет наличия у них перекрещивающегося участка L ; клон Х (из 2-ой
библиотеки ), используемый как зонд при изучении 1-ой библиотеки в про-
цессе блоттинга по Саузерну, идентифицирует клон В за счет наличия у них
перекрывающегося участка М ; клон В как зонд идентифицирует
клон Y (перекрывающийся участок N ) и т.д.
клон А
клон Х
клон В
клон Y
клон С
клон Z
FL
L
M
M
N
NO
O
P
PR
Использование перекрывающихся фрагментов позволяет определить по-
рядок расположения генов на исследуемом участке хромосомы , т.е. построить
карту контиг.
Рисунок 12. Схема процедуры прогулка по хромосоме”
                                           31
         библиотека геномной ДНК, полученная 1-ой рестриктазой


          F           L           M        N       O                 P            R

              библиотека геномной ДНК, полученная 2-ой рестриктазой

   Клоны библиотеки 1                              Клоны библиотеки 2
    A     F           L                                      L           M        X

    B         M               N                        N                 O        Y

    C                     O       P                      P               R        Z

      Ген F картирован на генетической карте, клонирован и установлена
его нуклеотидная последовательность. Это позволяет идентифицировать в
библиотеке геномной ДНК клоны, соответствующие соседним генам с помо-
щью методики “прогулка по хромосоме”.
      Клон А (из 1-ой библиотеки), используемый как зонд при изучении 2-
ой библиотеки, в процессе блоттинга по Саузерну, идентифиципует клон Х за
счет наличия у них перекрещивающегося участка L ;         клон Х (из 2-ой
библиотеки), используемый как зонд при изучении 1-ой библиотеки в про-
цессе блоттинга по Саузерну, идентифицирует клон В за счет наличия у них
перекрывающегося участка      М ;         клон В как зонд идентифицирует
клон Y (перекрывающийся участок N ) и т.д.

     F            L           клон А

                  L           M        клон Х

                              M        N        клон В


                                       N          O                  клон Y

                                                  O              P            клон

                                                клон Z           P            R

      Использование перекрывающихся фрагментов позволяет определить по-
рядок расположения генов на исследуемом участке хромосомы, т.е. построить
карту контиг.

     Рисунок 12. Схема процедуры “прогулка по хромосоме”