Лекции по генетике человека. Буторина А.К - 6 стр.

                                      6
      Существует два основных способа окрашивания хромосом:
тотальное и дифференциальное окрашивание.
      Тотальное окрашивание - наиболее простой способ окрашивания
хромосом, в котором используется краситель Гимза, или 2 % ацетоорсеин,
или 2% ацетокармин. Эти вещества вызывают окрашивание хромосом
целиком, равномерно и интенсивно. Для выявления численных аномалий
хромосом этот метод вполне достаточен. При тотальном окрашивании
хромосомы располагаются и нумеруются в зависимости от длины.
Согласно Денверской классификации (1960), хромосомы предложено
нумеровать от 1 до 23. При тотальном окрашивании нельзя
идентифицировать некоторые пары хромосом. На основании
относительной длины и положения центромеры Патау предложил
идентифицировать хромосомы. Он разбил 23 пары хромосом на 7 групп от
А до G. В соответствии с положением центромеры и относительной длины
хромосомы в кариотипе человека различают метацентрические
(равноплечие), субметацентрические (неравноплечие) и акроцентрические
(сильнонеравноплечие) хромосомы. Важным параметром при таком
способе определения хромосом является центромерный индекс, который
отражает отношение (в %) длины короткого плеча к длине всей
хромосомы.
      При тотальном окрашивании три пары метацентрических хромосом
группы А можно идентифицировать, в группе Е обычно легко выделить
хромосому 16. Все хромосомы групп В, С, D, F и G при тотальном
окрашивании не идентифицируются.
      Дифференциальное окрашивание.
      Многие исследователи отмечали в хромосомах, окрашенных по
обычной методике, некоторую неоднородность в плотности окрашивания
отдельных участков. Эти факты оставались без внимания, пока Касперсон
с сотрудниками в 1968 году не обнаружили, что после обработки акрихин-
ипритом флуоресценция по всей длине хромосомы распределена
неравномерно, а в виде сегментов. Затем ими же было показано, что
каждую хромосому человека можно легко идентифицировать с помощью
такого метода окрашивания, т.к. каждая хромосома обладает
специфическим распределением сегментов окрашивания. В дальнейшем
они доказали, что не только окраска акрихин-ипритом позволяет получить
сегменты, но и применение других красителей и методов обработки. На
Парижской конференции по стандартизации и номенклатуре хромосом
человека в 1971 году полученные к тому времени данные были
сопоставлены, и оказалось, что все методы выявляют в принципе одни и те
же структуры, но каждый из них специфичен в отношении определенных
хромосомных сегментов.
      Различные типы сегментов обозначают по методам, с помощью
которых они выявляются наиболее отчетливо:
      a) Q-сегменты - участки хромосом, флуоресцирующие после
окрашивания акрихин-ипритом или сходными соединениями;
      б) G-сегменты выявляются при окрашивании красителем Гимза в