Практическая газовая хроматография. Царев H.И - 140 стр.

140

деляют площади пиков всех таутомеров каждого моносахарида расчетом
площади треугольной аппроксимацией пика — умножением основания
пика на половину высоты. При частичном наложении пиков друг на дру-
га и невозможности прямого измерения основания площадь пика опреде-
ляют умножением его высоты на ширину, измеренную на половине вы-
соты. Возможно также определять долю каждого пика его переносом на
бумагу и взвешиванием вырезанного из нее пика на аналитических весах,
относя найденную массу к массе всех анализируемых пиков. Результат
выражают в процентах, используя метод нормировки площадей.
       По второму методу количественное определение массовой доли
конкретного моносахарида в смеси производят по площади пика одного
из его таутомеров, исходя из условия, что при синтезе ТМС-производных
в строго постоянных условиях соотношение таутомеров сохраняется по-
стоянным. Это позволяет для расчета выбрать наиболее разрешенный
пик, называемый характеристическим. В качестве таких пиков обычно
используют пики ТМС-производных β-L-арабинопиранозы, β-D-кси-
лопиранозы, α-D-маннопиранозы, α-D-галактопиранозы и β-D-
глюкопиранозы. Площади пиков остальных таутомеров непосредственно
не измеряют, а находят расчетом. С учетом доли характеристического
пика вычисляют общую площадь пиков всех таутомеров данного моно-
сахарида. Количественное соотношение таутомерных форм необходимо
устанавливать для данных условий хроматографирования и при их изме-
нении определение следуют проводить вновь. Долю конкретного моноса-
харида находят отнесением площади всех пиков данного моносахарида к
общей площади всех пиков.
       Количественное определение массы индивидуальных моносахари-
дов производят с использованием внутреннего стандарта (сорбита). Мас-
са сорбита, добавляемая в анализируемую смесь, должна обеспечить его
концентрацию в растворе, примерно соответствующую концентрации
индивидуальных моносахаридов. Расчет ведут по градуировочному гра-
фику. График получают, по данным хроматографирования эталонных
растворов, содержащих индивидуальный моносахарид и сорбит. Градуи-
ровочный график строят в координатах: по оси абсцисс — масса чистого
моносахарида в эталонном растворе, по оси ординат — отношение пло-
щади характеристического пика этого же моносахарида к площади пика
внутреннего стандарта. График имеет линейную форму. Прямую линию
проводят с использованием метода наименьших квадратов.
       Относительная ошибка определений сахаров в гидролизате зави-
сит от их массовой доли в анализируемой смеси и составляет 1−5%. Об-
щее время анализа при серийном проведении определений около 2 ч, не
считая времени на получение градуировочных графиков.