Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 32 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

31
осаждения. После этого центрифугируют, раствор отбрасывают, а осадок
два раза промывают водой порциями по 10 мл при перемешивании.
В осадке вместе с другими веществами находится глутатион, который
растворяют в соляной кислоте. Для этого к остатку в пробирке приливают
10 мл 1 н. раствора соляной кислоты и перемешивают стеклянной палоч-
кой в течение 5 мин.
Затем добавляют 1 мл 20%-ного раствора йодистого
калия, перемешивают и центрифугируют. Центрифугат переносят в колбу
для титрования емкостью 100 мл, а осадок промывают 10 мл воды при пе-
ремешивании. После центрифугирования раствор присоединяют к первому
центрифугату.
К полученному раствору добавляют 0,5 мл раствора крахмала и титру-
ют 0,001 н. раствором KJO
3
до появления неисчезающей синей окраски.
Один мл 0,001н. раствора KJO
3
соответствует 0,307 мг глутатиона. Содер-
жание глутатиона вычисляют по формуле:
n
Ka30700
X
= ,
где Х - содержание глутатиона ( в мг на 100 г исследуемого вещества);
а - объем 0,001 н. раствора йодата калия, затраченный при титровании
глутатиона (в мл);
К - нормальность раствора йодата калия;
n - навеска исследуемого вещества (в г); 30700 - нормальный титр глу-
татиона (в мг), умноженный на 100 для пересчета на 100 г вещества.
Реактивы
1. Раствор уксуснокислой окисной ртути
(0,3 н.). Отвешивают 16,25 г
HgO и растворяют при нагревании в 100 мл 20%-ного раствора уксусной
кислоты. Полученный раствор разбавляют дистиллированной водой до 500
мл.
2. Раствор йодата калия (0,001 н.). Готовится из 0,1 н. раствора раз-
бавлением дистиллированной водой. Для этого отбирают пипеткой 5 мл
0,1 н. раствора KJO
3
, помещают в мерную колбу на 500 мл, разбавляют во-
дой до метки и перемешивают.
3. Раствор йодистого калия (20%-ный). Отвешивают 20 г KJ ч.д.а.,
растворяют в воде, прибавляют 1 мл 2 н. раствора едкого натра, доводят
водой до 100 мл и сохраняют в темной склянке.
4. Раствор крахмала (0,5%-ный). Отвешивают 2,5 г растворимого крах-
мала и 10 мг HgJ
2
(для консервирования), растирают в фарфоровой ступке
с небольшим количеством воды и вливают в 500 мл кипящей воды, кипятят
1 мин и, если нужно, фильтруют.
осаждения. После этого центрифугируют, раствор отбрасывают, а осадок
два раза промывают водой порциями по 10 мл при перемешивании.
   В осадке вместе с другими веществами находится глутатион, который
растворяют в соляной кислоте. Для этого к остатку в пробирке приливают
10 мл 1 н. раствора соляной кислоты и перемешивают стеклянной палоч-
кой в течение 5 мин. Затем добавляют 1 мл 20%-ного раствора йодистого
калия, перемешивают и центрифугируют. Центрифугат переносят в колбу
для титрования емкостью 100 мл, а осадок промывают 10 мл воды при пе-
ремешивании. После центрифугирования раствор присоединяют к первому
центрифугату.
   К полученному раствору добавляют 0,5 мл раствора крахмала и титру-
ют 0,001 н. раствором KJO3 до появления неисчезающей синей окраски.
Один мл 0,001н. раствора KJO3 соответствует 0,307 мг глутатиона. Содер-
жание глутатиона вычисляют по формуле:
                                30700 ⋅ a ⋅ K
                            X=                ,
                                    n
где Х - содержание глутатиона ( в мг на 100 г исследуемого вещества);
    а - объем 0,001 н. раствора йодата калия, затраченный при титровании
глутатиона (в мл);
    К - нормальность раствора йодата калия;
    n - навеска исследуемого вещества (в г); 30700 - нормальный титр глу-
татиона (в мг), умноженный на 100 для пересчета на 100 г вещества.
                                 Реактивы
    1. Раствор уксуснокислой окисной ртути (0,3 н.). Отвешивают 16,25 г
HgO и растворяют при нагревании в 100 мл 20%-ного раствора уксусной
кислоты. Полученный раствор разбавляют дистиллированной водой до 500
мл.
    2. Раствор йодата калия (0,001 н.). Готовится из 0,1 н. раствора раз-
бавлением дистиллированной водой. Для этого отбирают пипеткой 5 мл
0,1 н. раствора KJO3, помещают в мерную колбу на 500 мл, разбавляют во-
дой до метки и перемешивают.
    3. Раствор йодистого калия (20%-ный). Отвешивают 20 г KJ ч.д.а.,
растворяют в воде, прибавляют 1 мл 2 н. раствора едкого натра, доводят
водой до 100 мл и сохраняют в темной склянке.
    4. Раствор крахмала (0,5%-ный). Отвешивают 2,5 г растворимого крах-
мала и 10 мг HgJ2 (для консервирования), растирают в фарфоровой ступке
с небольшим количеством воды и вливают в 500 мл кипящей воды, кипятят
1 мин и, если нужно, фильтруют.


                                                                       31