Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 31 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

БФУ им. Канта | Калининград

Составители: 

Рубрика: 

30
V
2
- общий объём жидкости в кювете, см
3
;
60 - коэффициент перевода секунд в минуты.
Литература
1. Ермаков А.И., Арасимович В.В., Ярош Н.П., Перуанский Ю.В., Луковнико-
ва Г.А., Иконникова М.И. Методы биохимического исследования растений. Л.:
Агропромиздат, 1987. С.43-44.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛУТАТИОНА
Глутатион является трипептидом, состоящим их трех аминокислот:
глутаминовой, цистеина и гликоколя.
При кислотном гидролизе глутатион распадается на составляющие его
аминокислоты. Глутатион играет важную роль в окислительно-восста-
новительных процессах, что обусловлено свойством сульфгидрильных
групп -SH- легко окисляться, превращаясь в дисульфидную форму -S-S-.
Сущность метода
Глутатион в слабощелочной среде с ацетатом ртути дает осадок глута-
тионата ртути:
2C
10
H
16
O
6
N
3
SH + Hg(CH
3
COO)
2
= Hg(C
10
H
16
O
6
N
3
S)
2
+ CH
3
COOH.
Осадок промывается водой и растворяется в соляной кислоте:
Hg(C10H16O16N3S)2 + 2HCl = HgCl2 + 2C10H16O6N3SH.
Раствор отделяется от не растворимых в воде веществ, и глутатион, пе-
решедший в раствор, титруется 0,001 н. раствором йодата калия в присут-
ствии йодистого калия и крахмала:
C
10
H
16
O
6
N
3
S
6 C
10
H
16
O
6
N
3
SH + KJO
3
+ 5KJ + 6HCl = 3 +
С
10
Н
16
О
6
N
3
S
+ 6HJ + 6KCl + 3 H
2
O
Йодистый калий прибавляется в избытке для связывания ионов ртути в
растворимое бесцветное комплексное соединение:
HgCl2 + 4KJ = K2[HgJ4].
Грамм-эквивалент глутатиона
6
SHNOHC6
361610
равен 307,3 [1].
Ход анализа
Отвешивают 4 г сырого растительного материла и тщательно растира-
ют в ступке с 2 мл 0,3 н. раствора уксуснокислой ртути и 2 мл 30 %-ного
раствора уксуснокислого натрия. Гомогенат из ступки переносят в цен-
трифужную пробирку, смывая остаток 10 мл дистиллированной воды, пе-
ремешивают стеклянной палочкой и оставляют на 10 мин для полноты 
     V2 - общий объём жидкости в кювете, см3;
     60 - коэффициент перевода секунд в минуты.
                               Литература
    1. Ермаков А.И., Арасимович В.В., Ярош Н.П., Перуанский Ю.В., Луковнико-
ва Г.А., Иконникова М.И. Методы биохимического исследования растений. Л.:
Агропромиздат, 1987. С.43-44.

                     ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛУТАТИОНА
   Глутатион является трипептидом, состоящим их трех аминокислот:
глутаминовой, цистеина и гликоколя.
   При кислотном гидролизе глутатион распадается на составляющие его
аминокислоты. Глутатион играет важную роль в окислительно-восста-
новительных процессах, что обусловлено свойством сульфгидрильных
групп -SH- легко окисляться, превращаясь в дисульфидную форму -S-S-.
                            Сущность метода
   Глутатион в слабощелочной среде с ацетатом ртути дает осадок глута-
тионата ртути:
     2C10H16O6N3SH + Hg(CH3COO)2 = Hg(C10H16O6N3S)2 + CH3COOH.
   Осадок промывается водой и растворяется в соляной кислоте:
         Hg(C10H16O16N3S)2 + 2HCl = HgCl2 + 2C10H16O6N3SH.
   Раствор отделяется от не растворимых в воде веществ, и глутатион, пе-
решедший в раствор, титруется 0,001 н. раствором йодата калия в присут-
ствии йодистого калия и крахмала:
                                                C10H16O6N3S
   6 C10H16O6N3SH + KJO3 + 5KJ + 6HCl = 3                       +
                                                С10Н16О6N3S
      + 6HJ + 6KCl + 3 H2O
   Йодистый калий прибавляется в избытке для связывания ионов ртути в
растворимое бесцветное комплексное соединение:
                         HgCl2 + 4KJ = K2[HgJ4].
                                  6C10 H16 O 6 N 3SH
   Грамм-эквивалент глутатиона                       равен 307,3 [1].
                                          6
                               Ход анализа
   Отвешивают 4 г сырого растительного материла и тщательно растира-
ют в ступке с 2 мл 0,3 н. раствора уксуснокислой ртути и 2 мл 30 %-ного
раствора уксуснокислого натрия. Гомогенат из ступки переносят в цен-
трифужную пробирку, смывая остаток 10 мл дистиллированной воды, пе-
ремешивают стеклянной палочкой и оставляют на 10 мин для полноты


30

Страницы