Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 41 стр.

мывают холодной водой. Оба экстракта объединяют с промывными вода-
ми и доводят до определенного объема. Во фракции определяют: 1) орто-
фосфат (Рорто); 2) фосфор соединений, гидролизующихся до ортофосфата в
течение 7 минут; 3) общий фосфор. Количество полифосфатов рассчиты-
вают по величине лабильного фосфора фракции:
                                Рпф = Р7 - Рорто.
    Органический фосфор определяют по разнице:
                          Рорг = Робщ - (Рпф + Рорто).
    Щелочерастворимая фракция, рН 12. Эту фракцию экстрагируют 0,05
н. NaOН (pH=12) при 0оС и тщательном перемешивании в течение 2 часов.
Экстракт отделяют центрифугированием, а остаток несколько раз промы-
вают холодной дистиллированой водой. Промывные воды объединяют с
экстрактом и доводят до определённого объёма. Фракцию анализируют так
же, как и предыдущую.
    Фракция, экстрагируемая НСlО4 при 90-1000С. Остаток после удаления
щелочерастворимых фракций обрабатывают 0,5 н. НСlО4 на водяной бане
при 90-100oС последовательно в течение 20 и 10 минут. Остаток после
центрифугирования тщательно промывают холодной дистиллированной
водой. Экстракты объединяют с промывными водами и доводят до опреде-
ленного объема. В объединенном экстаркте определяют: 1) ортофосфат;
2) общий фосфор. Считается, что ортофосфат этой фракции образуется в
основном в результате гидролиза неорганических полифосфатов. Поэтому
о количестве полифосфатов в данной фракции судят по величине ортофос-
фата: ПФ=Рорто.
    Органический фосфор рассчитывают по формуле:
                              Рорг = Робщ - Рорто.
    Фракция фосфопротеинов. После всех экстракций остаток сжигают с
концентрированной H2SO4 и HClO4 и определяют общий фосфор. По об-
щему фосфору судят о содержании фосфопротеинов:
                            Робщ = Рфосфопротеинов.
    Таким образом, данный метод позволяет учитывать пять различных
фракций полифосфатов: кислоторастворимые, солерастворимые, щелоче-
растворимые при рН 8-9, щелочерастворимые при рН 12 и полифосфаты,
экстрагируемые HClO4 при 90-100oС. Кроме того, эта методика дает воз-
можность судить о характере накопления фосфора в некоторых органиче-
ских соединениях. Так, органический фосфор кислоторастворимой (после
сорбции нуклеотидов) и солерастворимой фракций представлен в основ-
ном фосфором углеводов. Следовательно, органический фосфор обеих
фракций может отражать характер накопления фосфоуглеводов. О фосфо-
ре липидов можно судить по фосфору фракции, извлекаемой смесью эта-

40