Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 39 стр.

ской плотности он был разбавлен в 3 раза. Навеска растительного материа-
ла в пересчете на сухой вес 0,5 г. Количество фосфора РНК будет:
            Х РНК =
                    (0,836 − 0,606 ) ⋅100 ⋅ 3 = 0,72 мг/г сухого веса.
                           0,5 ⋅ 190
                               Литература
   1. Окунцов М.М.,. Боровик З.И., Гребенников А.С. и др. Специальный практи-
кум по биохимии и физиологии растений. Калининград, 1981. С.8-10.

         ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ НЕОРГАНИЧЕСКИХ
                             ПОЛИФОСФАТОВ
         (по Р. Лангену, Р. Лиссу, модификация И.С. Кулаева и др.)
    В обмене веществ многих низших организмов существенное место за-
нимают превращения неорганических полифосфатов, являющихся макро-
эргическими соединениями. Среди методов, используемых для количест-
венного определения этих соединений, в настоящее время наиболее удач-
ным является метод Лангена и Лисса, модифицированный И.С. Кулаевым с
сотрудниками. Данный метод [1] позволяет определять несколько фракций
неорганических полифосфатов, различающихся молекулярным весом,
внутриклеточной локализаций, а также физиологическим значением.
                               Ход анализа
    Кислоторастворимая фракция. Навеску исследуемого материала
(5-7 г) заливают 10-15 мл 0,5 н. НСlО4 и фиксируют в криогидратной сме-
си. После фиксации навеску с НСlО4 переносят в фарфоровую ступку, рас-
тирают с кварцевым песком до гомогенного состояния и прокачивают на
ротаторе 30 минут при пониженной температуре. Полученный гомогенат
центрифугируют в течение 5 минут при 3000 об/мин. Экстракт сливают и
ставят в холодильник. Осадок заливают 10 мл 0,5 н. НСlО4 и прокачивают
еще раз в течение 30 минут при 00С, а затем центрифугируют при тех же
условиях. Экстракты объединяют в мерной колбе, а осадок трижды про-
мывают холодной дистиллированной водой. Промывные воды объединяют
с кислотными экстрактами, немедленно нейтрализуют 0,2 н. NaOH по фе-
нолфталеину и доводят до определенного объема. Образующиеся хлопья
натриевой соли хлорной кислоты удаляют центрифугированием.
    Для количественного определения полифосфатов проводят следующие
операции. Сначала осуществляют сорбцию нуклеотидов на активирован-
ный уголь марки БАУ с размером частиц 0,5-1,0 мм или марки Norit A
(Голландия). Перед добавлением угля определяют оптическую плотность
экстракта при 260 нм. Сорбцию проводят на холоде при постоянном пере-
мешивании в течение 1-2 часов. Затем уголь отделяют либо цнтрифугиро-

38