Морфология и культивирование микроорганизмов. Чурикова В.В - 27 стр.

                                  27
    Приготовление          протравы: смешивают 2 объема 12 % водного
раствора алюминиевых квасцов с 1 объемом 10 % водного раствора
таннина, нагревают 30 мин - при 120о. При этом образуется комплексное
соединение, активно осаждающееся на жгутиках. Смесь фильтруют в
горячем виде, а затем хранят в холодильнике.
    Раствор для окраски жгутиков: 20 % раствор кристаллвиолета на
абсолютном спирту, который перед употреблением разводят абсолютным
спиртом – 1/200; 1/100; 1/50.

        Работа 8. Окраска спор и запасных включений в клетках
                             бактерий

    Протопласт – это цитоплазма со всеми клеточными структурами и
включениями.
    Цитоплазма – основное содержимое клетки; поверхностный слой ее –
цитоплазматическая мембрана – играет роль осмотического барьера. В
цитоплазме различают нуклеоид или диффузное ядро, рибосомы,
мезосомы, хроматофоры, аэросомы и др. У некоторых бактерий в
цитоплазме присутствуют споры и запасные включения.
    Споры – это образования, присущие лишь палочковидным формам
бактерий, – бациллам (среди кокковых форм как исключение споры имеют
Sporosarcina). Рассмотреть споры можно при наблюдении бактерий в
живом состоянии: благодаря сильному лучепреломлению споры вполне
различимы. Более отчетливо их можно видеть при использовании
специальных методов окраски. Довольно простым в исполнении является
способ окраски, предложенный Пешковым М.А.: приготавливают мазок
исследуемой культуры (например, сенной палочки) и фиксируют его на
пламени спиртовки. Затем на фиксированный мазок наливают
метиленовую синь Леффлера и доводят ее до кипения, держа препарат над
пламенем горелки. Кипятят 15-20 сек! После охлаждения смывают водой и
докрашивают 30 сек. 0,5-процентным водным раствором нейтрального
красного; промывают дистиллированной водой, высушивают и
микроскопируют с иммерсией. Вегетативные клетки будут окрашены в
розовый цвет, споры – в голубой или синий (в зависимости от возраста
культуры).
    Цитоплазматические включения – это различные продукты обмена,
появляющиеся, как правило, в период прекращения активного роста или
при недостатке питания. У разных видов микроорганизмов включения
могут иметь разное происхождение: органические вещества (липиды,
полисахариды, поли-β-оксимасляная кислота) и минеральные (сера, соли
кальция и др.). Большинство органических соединений представляет собой
запасной фонд веществ клетки.
    Гликоген – животный крахмал, содержится почти всегда в клетках
дрожжей, сенной палочки и некоторых других видов бактерий. Реактивом