Морфология и культивирование микроорганизмов. Чурикова В.В - 26 стр.

UptoLike

Рубрика: 

26
1. При подготовке препарата, осторожно прикасаясь
пастеровской пипеткой с запаянным концом к молодой агаровой
культуре , берут небольшое количество бактерий и опускают пипетку в
пробирку с 2 мл стерильной воды . Не взбалтывать, бактерии
самостоятельно переходят в воду.
2. На чистое покровное стекло капают 1 каплю бактериальной взвеси и
дают ей стечь, а избыток влаги снимают фильтровальной бумагой.
Препарат сушат при 30-40
о
, предохраняя от пыли и фиксируют 96 %
этиловым спиртом .
3. При окраске в небольшой фарфоровой чашечке смешивают 5 мл
протравы и 0,5 мл краски и нагревают до кипения. Каплю наносят на
препарат , окрашивают 20-30 сек и хорошо ополаскивают, чтобы смыть
пленку , образующуюся на поверхности протравы и оседающую на
препарат . Препарат сушат и просматривают с иммерсией. Клетки
бактерий окрашиваются в темно-лиловый цвет, а жгутики красятся
слабее.
Задание :
1. Приготовить препарат Azotobacter chroococcum, окрасить, рассмотреть
и зарисовать капсулы.
2. Окрасить жгутики у Spirillum sp., определить тип жгутикования.
Материалы и оборудование
Микроскоп и осветитель , бактериологическая петля, предметные и
покровные стекла, капельница с водопроводной водой, спиртовка , спички ,
кристаллизатор с мостиком, салфетки , пинцет, фильтровальная бумага ,
промывалка , дезинфицирующий раствор, окуляр - микрометр, объект -
микрометр, чистые культуры бактерий разной формы, настой конского
навоза , культуры азотобактера, сенной палочки , маслянокислых бактерий,
спирилл.
Фуксин Циля: 10 мл насыщенного спиртового раствора фуксина
основного смешивают со 100 мл 5 % водного раствора
свежеприготовленного фенола. Смесь через 48 часов фильтруют.
Краситель устойчив . Для окраски препарата азотобактера фуксин Циля
разбавляют в два раза .
Тушь: одну часть туши смешивают с девятью частями
дистиллированной воды и стерилизуют при 1 атм в течение 30 мин. в
пробирках, закрытых ватными пробками. Вместо стерилизации можно к
туши добавить несколько капель формалина. Тушь выдерживают 2 недели
для осаждения взмученных частиц .
Раствор метиленового синего по Леффлеру: насыщенный спиртовый
раствор метиленового синего 30 мл, дистиллированная вода 100 мл, 1 %
водный раствор КОН 1 мл.
0,5 % раствор нейтрального красного .
                                   26
1. При     подготовке    препарата,      осторожно            прикасаясь
   пастеровской пипеткой с запаянным концом к молодой агаровой
   культуре, берут небольшое количество бактерий и опускают пипетку в
   пробирку с 2 мл стерильной воды. Не взбалтывать, бактерии
   самостоятельно переходят в воду.
2. На чистое покровное стекло капают 1 каплю бактериальной взвеси и
   дают ей стечь, а избыток влаги снимают фильтровальной бумагой.
   Препарат сушат при 30-40о, предохраняя от пыли и фиксируют 96 %
   этиловым спиртом.
3. При окраске в небольшой фарфоровой чашечке смешивают 5 мл
   протравы и 0,5 мл краски и нагревают до кипения. Каплю наносят на
   препарат, окрашивают 20-30 сек и хорошо ополаскивают, чтобы смыть
   пленку, образующуюся на поверхности протравы и оседающую на
   препарат. Препарат сушат и просматривают с иммерсией. Клетки
   бактерий окрашиваются в темно-лиловый цвет, а жгутики красятся
   слабее.
     Задание:
1. Приготовить препарат Azotobacter chroococcum, окрасить, рассмотреть
   и зарисовать капсулы.
2. Окрасить жгутики у Spirillum sp., определить тип жгутикования.

                      Материалы и оборудование

     Микроскоп и осветитель, бактериологическая петля, предметные и
покровные стекла, капельница с водопроводной водой, спиртовка, спички,
кристаллизатор с мостиком, салфетки, пинцет, фильтровальная бумага,
промывалка, дезинфицирующий раствор, окуляр-микрометр, объект-
микрометр, чистые культуры бактерий разной формы, настой конского
навоза, культуры азотобактера, сенной палочки, маслянокислых бактерий,
спирилл.
     Фуксин Циля: 10 мл насыщенного спиртового раствора фуксина
основного смешивают со 100 мл 5 % водного раствора
свежеприготовленного фенола. Смесь через 48 часов фильтруют.
Краситель устойчив. Для окраски препарата азотобактера фуксин Циля
разбавляют в два раза.
     Тушь: одну часть туши смешивают с девятью частями
дистиллированной воды и стерилизуют при 1 атм в течение 30 мин. в
пробирках, закрытых ватными пробками. Вместо стерилизации можно к
туши добавить несколько капель формалина. Тушь выдерживают 2 недели
для осаждения взмученных частиц.
     Раствор метиленового синего по Леффлеру: насыщенный спиртовый
раствор метиленового синего 30 мл, дистиллированная вода 100 мл, 1 %
водный раствор КОН – 1 мл.
     0,5 % раствор нейтрального красного.