Морфология и культивирование микроорганизмов. Чурикова В.В - 28 стр.

                                   28
на гликоген служит раствор Люголя, окрашивающий его в красно-бурый
цвет.
     Гранулеза – крахмалоподобное вещество, накапливающееся в клетках
некоторых бактерий в качестве включений перед спорообразованием
(например, в клетках маслянокислых бактерий – Clostridium pasteurianum).
Обнаруживают гранулезу также раствором Люголя. Гранулеза
окрашивается йодом в темно-синий цвет. Окраску ведут так: к капле
суспензии исследуемой культуры добавляют каплю раствора Люголя и
микроскопируют.
     Волютин – комплексное запасное вещество, содержащее в основном
полифосфаты и, кроме того, РНК, магний, белки, липиды. Обнаруживается
при окрашивании метиленовой синью: зерна волютина приобретают
фиолетово-красный цвет. Хорошими объектами для исследования
являются азотобактер, молочнокислые бактерии (палочки), дрожжи.
     Порядок работы:
     1. Мазок исследуемой культуры на предметном стекле фиксируют
        нагреванием.
     2. Окрашивают мазок в течение 10-30оС в растворе метиленового
        синего по Леффлеру или в 1 %-ном (вес/объем) толуидиновом
        синем.
     3. Отмывают краситель водопроводной водой, подсушивают и
        микроскопируют.
     При окраске метиленовым синим гранулы полифосфата выглядят
шариками, имеющими цвет от синего до фиолетового, а вся остальная
цитоплазма окрашивается в светло-голубой цвет. При окрашивании
толуидиновым синим гранулы имеют красный цвет на фоне голубой
цитоплазмы.
     Поли-β-оксимасляная кислота – запасное включение.
     Порядок работы:
     1. Фиксированный        нагреванием     мазок      культуры      на
        предметном стекле погружают в раствор 0,3 % (вес/объем) судана
        черного В, приготовленного на этиленгликоле. Окрашивают в
        течение 5-15 минут.
     2. Краситель сливают и препарат высушивают на воздухе, положив
        стекло на фильтровальную бумагу.
     3. Несколько раз погружают и промывают предметное стекло в
        ксилоле, а затем подсушивают впитывающим ксилол материалом.
     4. Дополнительно окрашивают препарат в течение 5-10 мин. 0,5 %
        (вес/объем) водным сафранином.
     5. Промывают       предметное    стекло   водопроводной      водой,
        подсушивают и           микроскопируют. Включения поли-β-
        оксимасляной кислоты выглядят как черно-синие капельки, в то
        время как цитоплазма окрашена в розовый цвет.