Морфология и культивирование микроорганизмов. Чурикова В.В - 47 стр.

                                   47


           ТЕМА 6. ЧИСТЫЕ И ЭЛЕКТИВНЫЕ КУЛЬТУРЫ
                     МИКРООРГАНИЗМОВ

       Работа 15. Получение элективной культуры сенной палочки
                          Bacillus subtilis

    В основе выделения элективной культуры сенной палочки лежит
устойчивость ее спор к длительному кипячению.             Для создания
благоприятных условий необходимо также снабдить культуру
питательными веществами и обеспечить избыточную аэрацию, т.к. сенная
палочка является аэробной формой. Удаление из среды других
микроорганизмов достигается кипячением среды в течение времени,
достаточного для того, чтобы убить в среде все вегетативные формы
бактерий и споры менее устойчивых видов, но недостаточного для того,
чтобы убить споры сенной палочки.
    Порядок работы. В колбу помещают 10 г мелко нарезанного сена,
вносят щепотку мела для нейтрализации среды, доливают 200 мл воды и
кипятят в течение 15-20 минут. Затем отвар профильтровывают через вату,
вложенную в воронку, и разливают в колбы Эрленмейера слоем в 1-2 см
для создания аэрации. Колбы закрывают ватной пробкой, помещают в
кипящую водяную баню и кипятят еще 20 минут. При этом отмирает
большинство неспоровых микробов и часть споровых. После кипячения
заражают среду кусочками свежего сена. Колбы помещают в термостат
при t = 28-30оС. Через сутки во взятой из колбы пробе обнаруживаются
подвижные формы сенной палочки. В 2-суточной культуре на поверхности
образуется пленка (зооглея), состоящая из палочек, соединенных в нити. В
более старых культурах (6-7 дневных) наблюдается образование спор.
    Задание: 1. Вырастить элективную культуру сенной палочки.
2. Приготовить из элективной культуры сенной палочки Bacillus subtilis
препараты: раздавленная капля, висячая капля. 3. Зарисовать форму и
взаимное расположение клеток. 4. Рассмотреть фиксированный препарат,
используя иммерсионный объектив.

                      Материалы и оборудование
    Конические колбы на 100 мл, колбы на 500 мл, весы, разновесы,
калька, ножницы, мел, воронка, вата, водяная баня, сено, предметные и
покровные стекла, фуксин, стекла с лункой.

          Работа 16. Выделение бактерий в чистую культуру
    Чистая культура микроорганизма – это культура, представленная
бактериями одного вида. Изучение морфологических, физиологических,
биохимических свойств микроорганизмов возможно лишь в чистой
культуре. Существует несколько методов выделения чистой культуры,
основанных на разных принципах: 1) путем разбавления в жидкой