Основы биотехнологии: культивирование клеток человека и животных. Цыренов В.Ж. - 5 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

9 10
4) источник тканиорган;
5) тип клетки (если известно);
6) наименование штамма (буквенноене более 4 букв и се-
рия цифр нумерации);
7) номер клона, если штамм клонировался;
8) источник информации (ссылка на публикацию).
Выращиваемые клетки (ИКЧЖ) могут быть отнесены
к двум типам:
1. Интактные, вирусонетрансформированные.
2. Вирусотрансформированные клетки.
Успех культивирования первых во многом обуслов-
лен наличием адгезинов, благодаря которым они проявляют
эффект «заякоривания» на подлежащей поверхности стекла,
металла или пластика рост клеток происходит в виде моно-
слоя. Однако они не растут в суспензионных культурах.
Вирусотрансформированные клетки животных, напро-
тив, хорошо растут в виде суспензионных культур и хуже
или совсем не растут в адгезированном состоянии.
Имеются такие штаммы животных клеток, которые
могут расти и в прикрепленном состоянии, и в виде суспен-
зии. Прикрепившиеся клетки размножаются, растут и раз-
виваются до тех пор, пока не сольются в монослой, то есть
плотность клеток выступает тормозным сигналом. Однако
при смене питательной среды на новые порции наблюдается
дальнейшее разрастание клеток в форме нескольких слив-
шихся слоев. Подобного результата можно добиться при
использовании других факторов воздействия на клеточные
культуры (гормоны, ферменты, рН и т. д.). Тем не менее, на
практике широко пользуются монослойными культурами.
В настоящее время появилась еще одна группа куль-
тур тканейречь идет о клетках, полученных методами
генной инженерии или другим методом современной био-
технологии и требующих специальных условий культиви-
рования.
Для получения первичных трипнизированных культур
(интактные вирусонетрансформированные культуры),
удобнее всего использовать эмбриональные тканикожно-
мышечную, легочную и др. Эмбриональные клетки облада-
ют выраженной пролиферативной активностью вне орга-
низма и характеризуются стабильностью генома (табл. 1).
Таблица 1
. Митотическая активность (в %) клеток
различных первично трипсинизированных культур тканей
Срок культивирования, ч
Культура
24 48 72
Фибробласты эмбрионов мышей линии
BALB/c
13,0±1,2 28,9±2,0 21,2±0,6
Фибробласты эмбрионов крыс линии
Wistar
15,0±1,1 28,3±3,0 26,7±1,9
Фибробласты эмбриона человека
11,0±1,0 30,4±2,5 27,0±3,0
Фибробласты эмбриона хомяка
12,5±0,2 12,0±1,3 11,0±1,7
Фибробласты эмбриона крупного рога-
того скота
33,0±1,0 23,8±0,4 14,0±0,3
Фибробласты эмбриона кошки
17,9±3,9 26,7±4,7 27,5±9,7
Почка эмбриона человека
9,4±0,9 19,4±2,3 16,4±1,9
Почка эмбриона хомяка
5,0±0,5 9,0±1,0 6,5±0,1
Почка эмбриона крупного рогатого
скота
14,0±0,8 12,0±1,0 12,4±1,8
Молекула фибронектина состоит из 2-х субъединиц с
250 кДа, содержащих небольшие домены и соединенных s-
s-мостиками. Каждый домен состоит от 2145 до 2445 остат-
ков α-кислот. Каждый домен отвечает за одну функцию
фибропектина (соединение с фиброном, другой доменза
прикрепление к подложке, к пластику).
4) источник ткани – орган;                                        Для получения первичных трипнизированных культур
5) тип клетки (если известно);                               (интактные    вирусонетрансформированные      культуры),
6) наименование штамма (буквенное – не более 4 букв и се-    удобнее всего использовать эмбриональные ткани – кожно-
рия цифр нумерации);                                         мышечную, легочную и др. Эмбриональные клетки облада-
7) номер клона, если штамм клонировался;                     ют выраженной пролиферативной активностью вне орга-
8) источник информации (ссылка на публикацию).               низма и характеризуются стабильностью генома (табл. 1).
      Выращиваемые клетки (ИКЧЖ) могут быть отнесены
к двум типам:                                                                                                      Таблица 1
1. Интактные, вирусонетрансформированные.                                 . Митотическая активность (в %) клеток
2. Вирусотрансформированные клетки.                               различных первично трипсинизированных культур тканей
      Успех культивирования первых во многом обуслов-
                                                                                                     Срок культивирования, ч
лен наличием адгезинов, благодаря которым они проявляют                   Культура
                                                                                                     24        48        72
эффект «заякоривания» на подлежащей поверхности стекла,      Фибробласты эмбрионов мышей линии
металла или пластика рост клеток происходит в виде моно-                                           13,0±1,2   28,9±2,0   21,2±0,6
                                                             BALB/c
слоя. Однако они не растут в суспензионных культурах.        Фибробласты эмбрионов крыс линии
                                                                                                   15,0±1,1   28,3±3,0   26,7±1,9
      Вирусотрансформированные клетки животных, напро-       Wistar
тив, хорошо растут в виде суспензионных культур и хуже       Фибробласты эмбриона человека         11,0±1,0   30,4±2,5   27,0±3,0
                                                             Фибробласты эмбриона хомяка           12,5±0,2   12,0±1,3   11,0±1,7
или совсем не растут в адгезированном состоянии.
                                                             Фибробласты эмбриона крупного рога-
      Имеются такие штаммы животных клеток, которые          того скота
                                                                                                   33,0±1,0   23,8±0,4   14,0±0,3
могут расти и в прикрепленном состоянии, и в виде суспен-    Фибробласты эмбриона кошки            17,9±3,9   26,7±4,7   27,5±9,7
зии. Прикрепившиеся клетки размножаются, растут и раз-       Почка эмбриона человека               9,4±0,9    19,4±2,3   16,4±1,9
виваются до тех пор, пока не сольются в монослой, то есть    Почка эмбриона хомяка                 5,0±0,5    9,0±1,0    6,5±0,1
плотность клеток выступает тормозным сигналом. Однако        Почка эмбриона крупного рогатого
                                                                                                   14,0±0,8   12,0±1,0   12,4±1,8
при смене питательной среды на новые порции наблюдается      скота
дальнейшее разрастание клеток в форме нескольких слив-
шихся слоев. Подобного результата можно добиться при              Молекула фибронектина состоит из 2-х субъединиц с
использовании других факторов воздействия на клеточные       250 кДа, содержащих небольшие домены и соединенных s-
культуры (гормоны, ферменты, рН и т. д.). Тем не менее, на   s-мостиками. Каждый домен состоит от 2145 до 2445 остат-
практике широко пользуются монослойными культурами.          ков α-кислот. Каждый домен отвечает за одну функцию
      В настоящее время появилась еще одна группа куль-      фибропектина (соединение с фиброном, другой домен – за
тур тканей – речь идет о клетках, полученных методами        прикрепление к подложке, к пластику).
генной инженерии или другим методом современной био-
технологии и требующих специальных условий культиви-
рования.

                                                         9   10