Основы биотехнологии: культивирование клеток человека и животных. Цыренов В.Ж. - 6 стр.

                                                                                        2. СИСТЕМЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК
                                                                                              ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА

                                                                                     Системы культивирования животных клеток и тканей
                                   Рис.   2.    Схематическое изображение
                                               молекулы фибронектина с до-      делят на 2 группы: 1 группа – монослойные, когда клетки
                                               менами,      обеспечивающими     развиваются на поверхности стекла и пластика (бутылок,
                                               связь с фибрином (1), с колла-   матриц) или поверхности специальных носителей, погру-
                                               геном (2), с клеткой (3)
                                                                                женных в питательной среде. Культура клеток выращивает-
                                                                                ся в виде монослоя, в виде однослойной стационарной
                                                                                культуры. 2-я группа – суспензионные культуры, когда
     Фибринектин – это амфотерный гликопротеин стиму-                           клетки растут свободно (подобно микроорганизмам) в сус-
лирующий адгезию, в качестве связывающих мостиков                               пензии.
можно применять ионы Са и Mg.                                                        Для крупномасштабного получения суспензионных
     В прикрепляемости клеток большое значение имеют                            культур необходима промышленная аппаратура, соответст-
характеристики субстрата: гидрофильность его поверхности                        вующая двум главным требованиям: конструкция должна
(смачиваемость), протяженность и горизонтальность. Рас-                         быть рациональной, обеспечивающей интенсивное переме-
пластываемость клеток на подложке будет выше, если чис-                         шивание среды; кроме того, клетки должны находиться в
ло отрицательных зарядов оказывается не ниже 5 на площа-                        щадящих условиях. Не всегда легко соблюсти оба требова-
ди 10 нм2 клетки. Хорошо культивируются на стекле, алю-                         ния.
минии, резине, полистерине, тефлоне и т.п.                                           Для управляемого реактора культивирование клеток
                                                                                (по данным Института биофизики АН СССР, 1985 г) наибо-
                                                                                лее удобным является суспензионный метод. Данный метод
                                                                                требует наиболее однородного условия для культивирова-
                                                                                ния тканей, близких к тем, которые создаются при выращи-
                                                                                вании микроорганизмов.
                                                                                     Используя культивирование клеток в суспензии, мож-
                                                                                но получить большой выход клеток на единицу объема сре-
                                                                                ды при обильной подаче питательных веществ. Однако к
                                                                                такому типу культивирования удовлетворительно адапти-
                                                                                руются не все клетки, а лишь трансформированные, такие
Р и с . 3 . Механизм адгезии животной клетки к субстрату, несущему положи-      как Hela, кВ, ВИК-21 и др., а также лейкоцитарные культу-
             тельные (могут и отрицательные) заряды. А – адгезин, стрелки –     ры.
             электростатистические взаимодействия, пунктиры – связанные при
             участии двухвалентных катионов. АС – адсорбционный слой толщи-          Для культивирования животных клеток используют те
             ной 5 нм                                                           же технические средства, которые применяют для культи-
                                                                                вирования микроорганизмов. Однако в этих случаях доби-
                                                                          11    12