Основы биотехнологии: культивирование клеток человека и животных. Цыренов В.Ж. - 8 стр.

     Проблема обеспечения оптимальных условий культи-              Наиболее широко применяемыми синтетическими
вирования клеток человека и животных вне организма ещё      средами являются среда 199, среда Игла, ВМЕ, среда Мак-
далека от решения.                                          коя, среда RPM1, среда Финкера и др.
     Создание способа крупномасштабного культивирова-              В некоторых случаях к синтетическим средам добав-
ния клеток вне организма открыло возможность в получе-      ляют биологические жидкости: сыворотка, тканевые экс-
нии медикаментов, клеточных метаболитов и других цен-       тракты и др. Они обеспечивают клетки гормонами (корти-
ных веществ с заданными свойствами.                         коиды, инсулин, половые гормоны, простогландины и др.),
                                                            ростовыми факторами (эпидермиальным, фибробластным,
                                                            Т-клеточным, тромбоцитарным, опухоленекротическим и
 3. КРУПНОМАСШТАБНОЕ ВЫРАЩИВАНИЕ КЛЕТОК                     др.), факторами адгезии (коллаген, фибринонектин, лами-
           ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ                              нин – из мышиной саркомы), белками (альбумин, трансфер-
                                                            рин, фетуин 0,2% N-ацетилнейраминовой кислоты), микро-
      При культивировании учитываются разные парамет-       элементами, липидами, и другими БАВ для выращивания in
ры. Это константные параметры – качество материала, фор-    vitro. Обычно используются фетальную бычью сыворотку
ма и объем культуры. Это вариабельные параметры - ско-      (ФБС), а также сыворотки фирмы «Sigma» (США). Некото-
рость вращения или покачивания, качество и объем среды,     рые из них по качеству (для отдельных линий клеток) пре-
тип клеток и размер посевного материала, рН, t, О2, СО2,    восходят ФБС, например, сыворотка крови новорожденных
окислительно-восстановительный потенциал и концентра-       телят в возрасте до 10 дней и менее, менее 10-месячного
ция основных источников питания среды.                      возраста, а также лошадиная сыворотка от жеребцов, каст-
      Для ККЧЖ используются естественные среды:             рированных за год до взятия крови.
      1) коагулянты – сгусток плазмы;                              Вместо натуральных сывороток фирма IВF biotechnics
      2) биологические жидкости – сыворотка, амниотиче-     (Германия) предлагает высококачественные заменители, в
ская, асцитическая жидкость и др.;                          частности, ultroser G – для иммобилизованных клеток. Эта
      3) тканевые экстракты, например, эмбриональный экс-   среда содержит мало белка, благодаря чему упрощается
тракт.                                                      очистка биопродукта и достигается стабильность компо-
      Широко применяется в промышленности ряд синтети-      нентного состава.
ческих сред, в основе которых имеется смесь неорганиче-            Оптимальные показатели рН и температуры зависят от
ских солей – физиологический или сбалансированный соле-     происхождения и качества клеточных линий. Так, для кле-
вой раствор. Функция этого раствора заключается в сохра-    ток млекопитающих концентрацию водородных ионов под-
нении рН и осмотического давления среды, а также в обес-    держивают в пределах рН от 7,2 до 7,4, а температуру - в
печении биологического агента необходимыми неорганиче-      пределах +36 - +37,5°С. Поддержание рН осуществляют
скими веществами. Все среды содержат низкомолекулярные      обычно за счет буферных систем [(СО2 –NaHCO3) трис- и
вещества, причем, число ингредиентов превышает 50, в их     др.], а температуру - с помощью терморегуляторов.
числе глюкоза, необходимые аминокислоты, витамины и др.


                                                       15   16