Методические указания к самостоятельной работе и лабораторному практикуму по физической химии "Хроматографические методы анализа". Цыренова С.Б - 11 стр.

      в- расстояние от линии старта до линии фронта элюента.


       4. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ В БИОЛОГИЧЕ-
                СКИХ И МЕДИЦИНСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ

       В настоящее время хроматография - один из наиболее распространенных методов
анализа и выделения витаминов, антибиотиков, белков, гормонов, аминокислот и других
природных соединений. Для анализа и разделения применяются разнообразные хроматогра-
фические методы.
       Начиная с работ М.С. Цвета, открывшего (табл.2) элютивную жидкостно-
адсорбционную хроматографию, её развитие сопровождалось ростом числа приложений в
области биологии и медицины. Разработка А.Мартином и Р.Синджем (1941) жидкостной
распределительной хроматографии значительно расширила возможности хроматографиче-
ских методов. Преимуществами распределительной хроматографии является возможность
работы в области линейной изотермы сорбции, что позволяет избавиться от деформации
хроматографических полос. Кроме того, использование органических жидкостей в качестве
неподвижной фазы улучшает возможность набора необходимого сорбента. Она с успехом
применяется для анализа и разделения лекарственных препаратов, гормонов, пестицидов,
антибиотиков. Основным недостатком классической жидкостной хроматографии является
длительность процесса, достигающая суток.
       А. Джеймс и А.Мартин (1952) для разделения жирных кислот в качестве подвижной
фазы использовали газ, положив начало газовой хроматографии в газожидкостном варианте.
В связи с тем, что вязкость газа в 100 раз меньше вязкости жидкости, диффузионные процес-
сы протекают в нем очень быстро, и скорость движения газовой фазы можно повысить.
       Процесс разделения с помощью газовой хроматографии обычно не превышает 0,5ч.
Однако газовая хроматография не может быть использована для веществ, не переводимых в
летучее состояние (соединений с молекулярной массой, превышающий 300, солей, термиче-
ски нестойких соединений).
       С середины 60-х годов появился новый вариант жидкостной хроматографии, соче-
тающий быстроту газовой хроматографии с возможностью разделять нелетучие соединения.
В этом варианте, называемом высокоскоростной жидкостной хроматографией, используются
так называемые поверхностно-пористые насадки (сорбенты) в виде твердых частиц, не
имеющих глубоких пор и застойных областей жидкости. Ниже приводятся данные, характе-
ризующие различие методов жидкостной хроматографии:

                                                                               Таблица 1
                                   Классическая       Высокоскоростная
                                  хроматография        хроматография
               Диаметр ко-
                                      10 - 12                  1-3
               лонки, мм
               Размер час-
               тиц сорбента,        100 - 200                  < 40
               мкм
               Линейная
               скорость             10-5 - 10-4            1,5 - 3,5
               элюента, м/с
               Градиент        Под действием соб-
               давления        ственного веса жид-       до 10 Мпа/м
                                      кости