Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 11 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

9
биомассы не регулируется. Исходная величина рН среды
должна находиться в пределах 6,5-7,0. Температура культи-
вирования 28-29
о
С, продолжительность основной фермен-
тации 5-6 суток.[2]
Основные технологические этапы получения лимонной
кислоты глубинным культивированием Asp. niger:
• получение споровой суспензии продуцента;
• приготовление посевной и ферментационных сред;
• получение посевного материала;
• культивирование продуцента на основной фермен-
тационной среде;
• выделение лимонной кислоты.
Цель работы: культивирование Asp. niger глубинным
способом на сахарозоминеральных и глюкозоминеральных
средах с целью получения лимонной кислоты. Лаборатор-
ная работа рассчитана на 18 академических часов и выпол-
няется на 3-х занятиях.
Первое занятие
План работы
1.Приготовление посевной и ферментационной сред.
2.Определение рН посевной и ферментационной сред и до-
ведение до рН 7,0.
3.Определение сухих веществ по рефрактометру.
4.Определение содержания сахара по методу Бертрана.
Для регистрации результатов работы формируется ниже-
приведенный журнал наблюдения.
Таблица 1
№ ва-
рианта
рН фермен-
тационной. среды
% сухих
веществ
% РВ
1.Приготовление посевной и ферментационной сред
Получение спор. Asp. niger выращивают в чашках Петри
на сусло-агаровой среде. 7-8 суточные конидии собирали
для последующего культивирования в жидкой среде. Споры
с поверхности чашек собирают жидким способом (5 мл сте-
рильной воды).
Посевная сахарозоминеральная среда: (г/л) сахароза –
12,5; KH
2
PO
4
или K
2
HPO
4
– 10; MgSO
4
•7H
2
O – 10;
(NH
4
)
2
SO
4
– 10; KCl – 0,5; FeSO
4
– 0,01; ZnSO
4
– 0,05.
Культивирование посевной сахарозоминеральной среды
проводится не менее 36 часов.
Посевная глюкозоминеральная среда: (г/л) глюкоза – 24;
NH
4
Cl – 2,0; KH
2
PO
4
– 1,0; MgSO
4
•7H
2
O – 0,2; ZnSO
4
– 0,01;
MnSO
4
– 0,005.
Культивирование посевной глюкозоминеральной среды
проводится не менее 24 часов.
Посевные среды готовятся в количестве 50 мл в колбах на
250 мл. Суспензия спор вносится в количестве 1 мл.
Культивирование проводится на качалке при 200 об/мин
t=37-38
0
С.
Ферментационная сахарозоминеральная среда. (г/л):
Вариант № 1. Сахароза – 30; аспарагин – 1,0; NH
4
NO
3
–0,6;
KH
2
PO
4
– 1,0; MgSO
4
•7H
2
O – 0,5.
Вариант № 2. Сахароза – 30; аспарагин – 2,0; KH
2
PO
4
– 1,0;
MgSO
4
•7H
2
O – 0,5; CaCO
3
– 5,0.
Вариант № 3. Сахароза – 30; KH
2
PO
4
– 10; MgSO
4
•7H
2
O –
10; (NH
4
)
2
SO
4
– 10; KCl – 0,5; FeSO
4
– 0,01; ZnSO
4
– 0,05.
Ферментационная глюкозоминеральная среда, (г/л):
Вариант № 4. Глюкоза – 30; аспарагин – 1,0; NH
4
NO
3
–0,6;
KH
2
PO
4
– 1,0; MgSO
4
•7H
2
O – 0,5.
Вариант № 5 Глюкоза – 30; аспарагин – 2,0; KH
2
PO
4
– 1,0;
MgSO
4
•7H
2
O – 0,5; CaCO
3
– 5,0.
Вариант № 6. Глюкоза – 95,0; NH
4
Cl – 2,0; KH
2
PO
4
– 1,0;
MgSO
4
•7H
2
O – 0,2; ZnSO
4
– 0,01; MnSO
4
– 0,005. 
                                                            9

биомассы не регулируется. Исходная величина рН среды               1.Приготовление посевной и ферментационной сред
должна находиться в пределах 6,5-7,0. Температура культи-          Получение спор. Asp. niger выращивают в чашках Петри
вирования 28-29оС, продолжительность основной фермен-           на сусло-агаровой среде. 7-8 суточные конидии собирали
тации 5-6 суток.[2]                                             для последующего культивирования в жидкой среде. Споры
   Основные технологические этапы получения лимонной            с поверхности чашек собирают жидким способом (5 мл сте-
кислоты глубинным культивированием Asp. niger:                  рильной воды).
    • получение споровой суспензии продуцента;                     Посевная сахарозоминеральная среда: (г/л) сахароза –
    • приготовление посевной и ферментационных сред;            12,5; KH2PO4 или K2HPO4 – 10; MgSO4•7H2O – 10;
    • получение посевного материала;                            (NH4)2SO4 – 10; KCl – 0,5; FeSO4 – 0,01; ZnSO4 – 0,05.
    • культивирование продуцента на основной фермен-            Культивирование посевной сахарозоминеральной среды
        тационной среде;                                        проводится не менее 36 часов.
    • выделение лимонной кислоты.                                  Посевная глюкозоминеральная среда: (г/л) глюкоза – 24;
    Цель работы: культивирование Asp. niger глубинным           NH4Cl – 2,0; KH2PO4 – 1,0; MgSO4•7H2O – 0,2; ZnSO4 – 0,01;
 способом на сахарозоминеральных и глюкозоминеральных           MnSO4 – 0,005.
 средах с целью получения лимонной кислоты. Лаборатор-          Культивирование посевной глюкозоминеральной среды
 ная работа рассчитана на 18 академических часов и выпол-       проводится не менее 24 часов.
 няется на 3-х занятиях.                                          Посевные среды готовятся в количестве 50 мл в колбах на
                                                                250 мл. Суспензия спор вносится в количестве 1 мл.
                    Первое занятие                                 Культивирование проводится на качалке при 200 об/мин
                                                                t=37-380С.
               План работы                                         Ферментационная сахарозоминеральная среда. (г/л):
1.Приготовление посевной и ферментационной сред.                Вариант № 1. Сахароза – 30; аспарагин – 1,0; NH4NO3 –0,6;
2.Определение рН посевной и ферментационной сред и до-          KH2PO4 – 1,0; MgSO4•7H2O – 0,5.
ведение до рН 7,0.                                              Вариант № 2. Сахароза – 30; аспарагин – 2,0; KH2PO4 – 1,0;
3.Определение сухих веществ по рефрактометру.                   MgSO4•7H2O – 0,5; CaCO3 – 5,0.
4.Определение содержания сахара по методу Бертрана.             Вариант № 3. Сахароза – 30; KH2PO4 – 10; MgSO4•7H2O –
Для регистрации результатов работы формируется ниже-            10; (NH4)2SO4 – 10; KCl – 0,5; FeSO4 – 0,01; ZnSO4 – 0,05.
приведенный журнал наблюдения.                                       Ферментационная глюкозоминеральная среда, (г/л):
                                              Таблица 1         Вариант № 4. Глюкоза – 30; аспарагин – 1,0; NH4NO3 –0,6;
№ ва- рН            фермен- %         сухих % РВ                KH2PO4 – 1,0; MgSO4•7H2O – 0,5.
рианта тационной. среды      веществ                            Вариант № 5 Глюкоза – 30; аспарагин – 2,0; KH2PO4 – 1,0;
                                                                MgSO4•7H2O – 0,5; CaCO3 – 5,0.
                                                                Вариант № 6. Глюкоза – 95,0; NH4Cl – 2,0; KH2PO4 – 1,0;
                                                                MgSO4•7H2O – 0,2; ZnSO4 – 0,01; MnSO4 – 0,005.

Страницы