Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 12 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

10
Ферментационная среда готовится в количестве 100 мл в
колбах на 500 мл. Посевная среда добавляется из расчета
10% к ферментационной среде. Культивирование проводит-
ся на качалке 200 об/мин t= 28-29
о
С в течение 7-8 суток.
Стерилизуют среды в автоклаве при 0,5 ати в течение 30
мин.
2.Определение рН посевной и ферментационной сред
и доведение до рН 7,0
рН среды определяется потенциомтерически. В качестве
титровальных растворов используются 10%-ные растворы
NaOH и H
2
SO
4
.
3.Определение сухих веществ по рефрактометру
В оставшейся после розлива в колбы исходной среде оп-
ределяется содержание сухих веществ по рефрактометру.
Для этого 10-12 мл среды, при необходимости, профильтро-
вывают через складчатый фильтр в пробирку, доводят тем-
пературу фильтрата до 20
о
С и производят замер показаний
на рефрактометре.
4.Определение содержания сахара по
методу Бертрана
4.1. Инверсия сахара
Инверсия сахара среды осуществляется с помощью ки-
слотного гидролиза.
Оборудование и посуда: водяная баня, мерная колба на
50 мл, индикаторная универсальная бумага, бумажный
фильтр, воронка.
Реактивы: 5%-ный раствор HCl, насыщенный раствор
Na
2
CO
3
, раствор I
2.
Ход работы:
В мерную колбу на 50 мл переносят 12,5 мл среды.
Таблица 2
Реактивы, обра-
ботка
Количество, время Примечание
5%-ный раствор
HCl
Выдержка на ки-
пящей водяной
бане
Na
2
CO
3
насы-
щенный раствор
Н
2
О
Раствор I
2
12,5 мл
20-30 мин
До слабокислой
реакции
До метки
1-2 капли
Фильтрование
Охлаждение под
струей холодной
воды
По индикаторной
бумаге
Проверка на пол-
ноту инверсии
Через бумажный
фильтр.
Фильтрат используется для определения редуцирующих
сахаров.
4.2. Определение редуцирующих сахаров в среде
Метод основан на способности редуцирующих сахаров
среды восстанавливать щелочной раствор окиси меди в за-
кись и учете последней путем воздействия на нее раствором
сульфата окисного (трехвалентного) железа, сильно под-
кисленного серной кислотой. Количество восстановленного
при этом железа определяется титрованием перманганатом
калия. Процесс сводится к следующим реакциям:
2CuO + редицирующий сахар → Cu
2
O;
Cu
2
O + Fe
2
(SO
4
)
3
+ H
2
SO
4
→ CuSO
4
+ 2FeSO
4
+ H
2
O; 
                                                            10

   Ферментационная среда готовится в количестве 100 мл в                              Ход работы:
колбах на 500 мл. Посевная среда добавляется из расчета            В мерную колбу на 50 мл переносят 12,5 мл среды.
10% к ферментационной среде. Культивирование проводит-                                                          Таблица 2
ся на качалке 200 об/мин t= 28-29оС в течение 7-8 суток.           Реактивы, обра-   Количество, время     Примечание
   Стерилизуют среды в автоклаве при 0,5 ати в течение 30               ботка
мин.                                                             5%-ный раствор 12,5 мл
                                                                 HCl
  2.Определение рН посевной и ферментационной сред
                 и доведение до рН 7,0                           Выдержка на ки- 20-30 мин               Охлаждение под
рН среды определяется потенциомтерически. В качестве             пящей водяной                           струей холодной
титровальных растворов используются 10%-ные растворы             бане                                    воды
NaOH и H2SO4.
                                                                 Na2CO3    насы- До слабокислой По индикаторной
     3.Определение сухих веществ по рефрактометру                щенный раствор реакции         бумаге
   В оставшейся после розлива в колбы исходной среде оп-
ределяется содержание сухих веществ по рефрактометру.            Н2О                 До метки
Для этого 10-12 мл среды, при необходимости, профильтро-
вывают через складчатый фильтр в пробирку, доводят тем-          Раствор I2          1-2 капли           Проверка на пол-
пературу фильтрата до 20оС и производят замер показаний                                                  ноту инверсии
на рефрактометре.
                                                                                     Фильтрование       Через бумажный
                                                                                                        фильтр.
          4.Определение содержания сахара по                        Фильтрат используется для определения редуцирующих
                     методу Бертрана                             сахаров.
                    4.1. Инверсия сахара                               4.2. Определение редуцирующих сахаров в среде
   Инверсия сахара среды осуществляется с помощью ки-               Метод основан на способности редуцирующих сахаров
слотного гидролиза.                                              среды восстанавливать щелочной раствор окиси меди в за-
   Оборудование и посуда: водяная баня, мерная колба на          кись и учете последней путем воздействия на нее раствором
50 мл, индикаторная универсальная бумага, бумажный               сульфата окисного (трехвалентного) железа, сильно под-
фильтр, воронка.                                                 кисленного серной кислотой. Количество восстановленного
   Реактивы: 5%-ный раствор HCl, насыщенный раствор              при этом железа определяется титрованием перманганатом
Na2CO3, раствор I2.                                              калия. Процесс сводится к следующим реакциям:
                                                                              2CuO + редицирующий сахар → Cu2O;
                                                                       Cu2O + Fe2(SO4)3 + H2SO4 → CuSO4 + 2FeSO4 + H2O;

Страницы