Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 14 стр.

UptoLike

Рубрика: 

12
Второе занятие
План работы
1. Определение биомассы.
2. Определение рН среды.
3. Определение общей титруемой кислотности.
4. Определение содержания сахара по Бертрану.
5. Определение лимонной, щавелевой и глюконовой ки-
слот и их расчет.
Для регистрации результатов работы формируется ниже-
приведенный журнал наблюдения
Таблица 4
Влага
Мас-са
пус-
той
бюк-
сы
Мас-са
бюк-
сы
с
навес-
кой
Масса
после
высу-
ши-
вания
Титруе-
мая
кислотно
сть
рН
сре-
ды
%
РВ
Со-
держа
ние
лимон-
ной
киc-
лоты
Со-
держа
ние
щаве-
левой
кис-
лоты
Со-
держа-
ние
глю-
коно-
вой
кис-
лоты
1.Определение биомассы
Метод основан на высушивании навески суспензии
микроорганизмов до постоянной массы. Взвесить чис-
тые бюксы с погрешностью не более 0,0003 г. Первый
метод: суспензию микроорганизмов тщательно переме-
шать и быстро, не давая биомассе осесть, отобрать пи-
петкой 1 мл в подготовленную бюксу. Бюксу с суспен-
зией взвесить, затем поместить в сушильный шкаф. Вы-
сушивание проводить до постоянной массы. Второй ме-
тод: взять фильтровальную бумагу высушить до посто-
янной массы, взвесить и отфильтровать через эту бумагу
суспензию.
Содержание абсолютно сухих веществ в суспензии
(Х) в процентах рассчитывается по формуле:
Х = %100
)(
)()(
1
21
MM
MMMM
,
где Ммасса пустой бюксы или фильтра;
М
1
масса бюксы или фильтра с навеской;
М
2
масса бюксы или фильтра с навеской после вы-
сушивания.
2.Определение рН среды
рН среды определяется потенциомтерически
3. Определение общей титруемой кислотности
Отбирают 5 мл анализируемого раствора, разбавляют его
дистиллированной водой до 150 мл, добавляют 3-4 капли
фенолфталеина и титруют 0,025н раствором щелочи.
Содержание лимонной кислоты (Х) в % вычисляют по
формуле :
Х =
10030
5
150100
=
FA
FA
где Аколичество щелочи, пошедшей на титрование, в мл;
F фактор щелочи по лимонной кислоте (1 мл 0,1н
раствора NaOH соответствует 0,007 г лимонной кислоты).
При использовании 0,025н раствора NaOH пересчиты-
вают фактор щелочи по лимонной кислоте
1 мл 0,1 н NaOH - F
0,1
= 0,007 лимонной кислоты;
1 мл 0,025н NaOH - F
0,025
= X .
Тогда F
0,025н NaOH
=
1,0
025,0007,0
= 0,00175 г .
1 мл 0,025н NaOH эквивалентен 0,00175 г лимонной кисло-
ты.[14].
Пример расчета.
Титрование проводилось 0,025н NaOH; А = 2,6 мл .
                                                                            12

                           Второе занятие                                                                (M1 − M ) − (M 2 − M )
                                                                                                          Х=                    • 100% ,
                                                                                                               (M1 − M )
            План работы
                                                                                    где М – масса пустой бюксы или фильтра;
1. Определение биомассы.
                                                                                        М1 – масса бюксы или фильтра с навеской;
2. Определение рН среды.
                                                                                        М2 – масса бюксы или фильтра с навеской после вы-
3. Определение общей титруемой кислотности.
                                                                                    сушивания.
4. Определение содержания сахара по Бертрану.
                                                                                                  2.Определение рН среды
5. Определение лимонной, щавелевой и глюконовой ки-
                                                                                    рН среды определяется потенциомтерически
   слот и их расчет.
Для регистрации результатов работы формируется ниже-
                                                                                     3. Определение общей титруемой кислотности
приведенный журнал наблюдения
                                                                                   Отбирают 5 мл анализируемого раствора, разбавляют его
                                              Таблица 4
           Влага           Титруе-    рН     %    Со-      Со-     Со-
                                                                                 дистиллированной водой до 150 мл, добавляют 3-4 капли
 Мас-са   Мас-са   Масса   мая        сре-   РВ   держа    держа   держа-        фенолфталеина и титруют 0,025н раствором щелочи.
 пус-     бюк-     после   кислотно   ды          ние      ние     ние
 той      сы       высу-   сть                    лимон-   щаве-   глю-
                                                                                   Содержание лимонной кислоты (Х) в % вычисляют по
 бюк-      с       ши-                            ной      левой   коно-         формуле :
                                                  киc-     кис-    вой
 сы       навес-   вания
                                                                                                      A • F • 100 • 150
          кой                                     лоты     лоты    кис-
                                                                   лоты
                                                                                                  Х=                    = A • F • 30 • 100
                                                                                                              5

                                                                                 где А – количество щелочи, пошедшей на титрование, в мл;
                  1.Определение биомассы                                             F – фактор щелочи по лимонной кислоте (1 мл 0,1н
        Метод основан на высушивании навески суспензии                           раствора NaOH соответствует 0,007 г лимонной кислоты).
     микроорганизмов до постоянной массы. Взвесить чис-                             При использовании 0,025н раствора NaOH пересчиты-
     тые бюксы с погрешностью не более 0,0003 г. Первый                          вают фактор щелочи по лимонной кислоте
     метод: суспензию микроорганизмов тщательно переме-                                  1 мл 0,1 н NaOH - F0,1 = 0,007 лимонной кислоты;
     шать и быстро, не давая биомассе осесть, отобрать пи-                                1 мл 0,025н NaOH - F0,025 = X .
     петкой 1 мл в подготовленную бюксу. Бюксу с суспен-
     зией взвесить, затем поместить в сушильный шкаф. Вы-                                            0,007 • 0,025
     сушивание проводить до постоянной массы. Второй ме-                         Тогда   F0,025н NaOH =            = 0,00175 г .
                                                                                                          0,1
     тод: взять фильтровальную бумагу высушить до посто-
     янной массы, взвесить и отфильтровать через эту бумагу                       1 мл 0,025н NaOH эквивалентен 0,00175 г лимонной кисло-
     суспензию.                                                                  ты.[14].
        Содержание абсолютно сухих веществ в суспензии
     (Х) в процентах рассчитывается по формуле:                                                     Пример расчета.
                                                                                 Титрование проводилось 0,025н NaOH; А = 2,6 мл .