Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 15 стр.

UptoLike

Рубрика: 

13
Рассчитаем Х =
5
15010000175,06,2
=13,65% .
Узнаем количество кислоты во всем растворе = V
к.ж.
29,12
100
65,13
90
100
65,13
== г .
V
к.ж.
объем раствора культуральной жидкости (90 мл) .
Узнаем количество кислоты в 1 мл следующим образом
13,65 - 100
х - 1
х =
100
65,13
= 0,1365 г или
136 мг в 1мл .
4. Определение содержания сахара в культуральной
жидкости по Бертрану
В процессе жизнедеятельности гриба основная масса са-
хара превращается в лимонную кислоту и потребляется в
процессе энергетического обмена, в связи с чем определе-
ние сахара можно вести непосредственно в культуральной
жидкости без разбавления.
Гидролиз также не проводится, т. к. в кислой среде и под
действием инвертазы сахароза среды полностью превраща-
ется в инвертный сахар.
На определение остаточного сахара по методу Бертрана
берется 10 мл культуральной жидкости.
Рассчитывается количество сахара в 100 мл культураль-
ной жидкости (%).
Пример расчета.
В анализируемой пробе было найдено в 10 мл культу-
ральной жидкости, например, 20,8 мг РВ, тогда во всей про-
бе будет остаточного сахара (С
ост
):
С
ост
= 208,0
100010
1008,20
=
г ,
где 10 млвзятое на анализ количество культуральной
жидкости;
100 млобщий объем культуральной жидкости;
1000
коэффициент пересчета в граммы.
5. Определение лимонной, щавелевой и глюконовой
кислот и их расчет
Раздельное определение кислот основано на различной
растворимости их кальциевых солей в воде и слабокислом
растворе.
Лимоннокислый кальций очень слабо растворим в горя-
чей воде и хорошо растворим в разбавленной соляной ки-
слоте. Щавелевокислый кальций практически нерастворим
ни в воде, ни в слабом растворе соляной кислоты. Глюконо-
вокислый кальций хорошо растворим в воде.
5.1.
Определение суммы лимонной и щавелевой кислот.
При нейтрализации культуральной жидкости хлористым
кальцием в присутствии аммиака цитрат и оксалат кальция
выпадают в осадок, а глюконат остается в растворе:
2C
6
H
8
O
7
+ 3CaCl
2
+ 6NH
4
OH = Ca
3
(C
6
H
5
O
7
)
2
+ 6NH
4
Cl +
+6H
2
O;
C
2
H
2
O
4
+ CaCl
2
+ 2NH
4
OH = CaC
2
O
4
+ 2NH
4
Cl + 2H
2
O;
2C
6
H
12
O
7
+ CaCl
2
+ 2NH
4
OH = Ca(C
6
H
11
O
7
)
2
+ 2NH
4
Cl +
+2H
2
O.
                                                              13

                                                                                        Пример расчета.
                 2,6 • 0,00175 • 100 • 150                           В анализируемой пробе было найдено в 10 мл культу-
Рассчитаем Х =                             =13,65% .               ральной жидкости, например, 20,8 мг РВ, тогда во всей про-
                             5
                                                                   бе будет остаточного сахара (Сост):
Узнаем количество кислоты во всем растворе = Vк.ж. •
  13,65        13,65                                                                          20,8 • 100
•       = 90 •       = 12,29 г .                                                     Сост =              = 0,208 г ,
   100          100                                                                           10 • 1000
Vк.ж. – объем раствора культуральной жидкости (90 мл) .
Узнаем количество кислоты в 1 мл следующим образом                    где 10 мл – взятое на анализ количество культуральной
                            13,65 - 100                            жидкости;
                             х -       1                              100 мл – общий объем культуральной жидкости;
                      13,65                                          1000 – коэффициент пересчета в граммы.
                  х=        = 0,1365 г или
                       100                                             5. Определение лимонной, щавелевой и глюконовой
                               136 мг в 1мл .                                          кислот и их расчет
                                                                      Раздельное определение кислот основано на различной
   4. Определение содержания сахара в культуральной                растворимости их кальциевых солей в воде и слабокислом
                 жидкости по Бертрану                              растворе.
   В процессе жизнедеятельности гриба основная масса са-              Лимоннокислый кальций очень слабо растворим в горя-
хара превращается в лимонную кислоту и потребляется в              чей воде и хорошо растворим в разбавленной соляной ки-
процессе энергетического обмена, в связи с чем определе-           слоте. Щавелевокислый кальций практически нерастворим
ние сахара можно вести непосредственно в культуральной             ни в воде, ни в слабом растворе соляной кислоты. Глюконо-
жидкости без разбавления.                                          вокислый кальций хорошо растворим в воде.
   Гидролиз также не проводится, т. к. в кислой среде и под
действием инвертазы сахароза среды полностью превраща-               5.1. Определение суммы лимонной и щавелевой кислот.
ется в инвертный сахар.                                               При нейтрализации культуральной жидкости хлористым
   На определение остаточного сахара по методу Бертрана            кальцием в присутствии аммиака цитрат и оксалат кальция
берется 10 мл культуральной жидкости.                              выпадают в осадок, а глюконат остается в растворе:
   Рассчитывается количество сахара в 100 мл культураль-            2C6H8O7 + 3CaCl2 + 6NH4OH = Ca3(C6H5O7)2 ↓+ 6NH4Cl +
ной жидкости (%).                                                                           +6H2O;
                                                                     C2H2O4 + CaCl2 + 2NH4OH = CaC2O4↓ + 2NH4Cl + 2H2O;
                                                                     2C6H12O7 + CaCl2 + 2NH4OH = Ca(C6H11O7)2 + 2NH4Cl +
                                                                                            +2H2O.