Идентификация и исследование экспрессии генов. Епринцев А.Т - 34 стр.

UptoLike

34
сколько пиков, каждый из которых будет соответствовать своему ампли-
кону. Наличие ампликонов с разной температурой плавления свидетельст-
вует о накоплении неспецифических продуктов ПЦР.
Рис. 12. Исследование полученных ампликонов с помощью «кривых
плавления». Tm 1 и Tm 2 – температура плавления продуктов реакции.
Пунктирная линияинтенсивность свечения ПЦР-продуктов, содержащих
флуоресцентную метку. Сплошная линияинтенсивность свечения
референсного красителя
Процедура проведения ПЦР в реальном времени имеет некоторые от-
личия от базовой, связанные с необходимостью детекции продуктов ам-
плификации после каждого цикла.
Работа 10. Методика амплификации с использованием красителя
SYBR Green
1)
Подготовить все необходимые реагенты для проведения ПЦР.
2)
В стерильной пробирке смешать компоненты в следующих соотно-
шениях:
сколько пиков, каждый из которых будет соответствовать своему ампли-
кону. Наличие ампликонов с разной температурой плавления свидетельст-
вует о накоплении неспецифических продуктов ПЦР.




    Рис. 12. Исследование полученных ампликонов с помощью «кривых
  плавления». Tm 1 и Tm 2 – температура плавления продуктов реакции.
Пунктирная линия – интенсивность свечения ПЦР-продуктов, содержащих
   флуоресцентную метку. Сплошная линия – интенсивность свечения
                       референсного красителя

    Процедура проведения ПЦР в реальном времени имеет некоторые от-
личия от базовой, связанные с необходимостью детекции продуктов ам-
плификации после каждого цикла.


    Работа 10. Методика амплификации с использованием красителя
SYBR Green


  1) Подготовить все необходимые реагенты для проведения ПЦР.
  2) В стерильной пробирке смешать компоненты в следующих соотно-
      шениях:
                                  34