Основы клинической иммунологии и методологические подходы к оценке иммунного статуса. Гончаров А.Г - 55 стр.

количество частиц латекса, поглощеных фагоцитировавшей клеткой, - фагоци-
тарное число (ФЧ). Рассчитывается интегральный фагоцитарный индекс по
формуле:
                                    ФП × ФЧ
                              ИФИ =         ,
                                      100
где ИФИ - интегральный фагоцитарный индекс;
    ФП - фагоцитарный показатель, %;
    ФЧ - фагоцитарное число.

        ПОСТАНОВКА НИТРОСИНЕГО ТЕТРАЗОЛИЕВОГО ТЕСТА

    Принцип нитросинего тетразолиевого теста заключается в поглощении из
среды фагоцитирующими клетками бесцветного нитросинего тетразолия (НСТ)
и восстановлении его в темно-синий диформазан. Активность восстановления
НСТ отражает состояние бактерицидных пероксидазных систем клетки и корре-
лирует с образованием супероксидных радикалов.

                        Материалы и оборудование
   1. 0,2 % раствор нитросинего тетразолия.
   2. 2 % водный раствор метилового зеленого.
   3. Водяная баня.
   4. Метанол.
   5. Предметные стекла.
   6. Силиконированные пробирки.

                             Описание метода
    Для постановки НСТ-теста к 0,1 мл лейковзвеси добавляют 0,1 мл 0,2 % нит-
росинего тетразолия. Смесь инкубируют в водяной бане при температуре 37°С в
течение 25 мин и при комнатной температуре в течение 15 мин. Далее клетки
трижды отмывают средой 199 и готовят препараты. Высушенные препараты
фиксируют метанолом и окрашивают 2 % водным раствором метилового зелено-
го от 30 с до 5 мин.

                               Учет реакции
    Учет реакции включает в себя подсчет относительного и абсолютного коли-
чества диформазан-положительных лейкоцитов (возможно для специальных ис-
следований расчет производить отдельно для нейтрофилов и моноцитов), вы-
числение среднего цитохимического коэффициента реакции (СЦК). Для опреде-
ления СЦК при учете реакции отмечают диформазан-отрицательные клетки
(0 степень активности), клетки с единичными гранулами диформазана или с
площадью, окрашенной диформазаном, до 25-30 % (1 степень активности); клет-
ки, цитоплазма которых на 30-70 % занята глыбками диформазана (2 степень


                                                                           53