ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
85
ПРИЛОЖЕНИЕ 3
Тесты для идентификации патогенных
и условно-патогенных микроорганизмов
Стафилококки
Морфологически Staphylococcus- грамположительные
кокки, располагающиеся в виде характерных «виноградных
гроздей». Патогенные стафилококки на кровяном агаре
образуют колонии диаметром 2—3 мм, окруженные прозрачной
зоной гемолиза; на молочно- или желточно-солевом агаре -
колонии, окруженные зоной просветления (протеолитическая
активность) и радужным венчиком (наличие фермента-
лецитовителлазы).
Из подозрительных колоний делают высев на скошенный
мясопептонный агар для выделения чистой культуры. После 24
ч инкубации при температуре 37°С проверяется
плазмокоагулирующая активность культуры посевом в
пробирки с 0,5 мл цитратной плазмы (человеческой или
кроличьей) в разведении 1:4. Патогенные стафилококки
коагулируют плазму в течение 2—24 ч в условиях термостата.
Учет производят через 1, 2, 4 и затем 24 ч по образованию
небольшого желеобразного сгустка на дне пробирки.
Выделенные стафилококки подвергаются фаготипированию при
необходимости установления источника возникновения
стафилококковой инфекции и путей распространения.
Стрептококки
Один из представителей - Str.viridans (зеленящий
стрептококк) - постоянный непатогенный обитатель зева. На
кровяном агаре Streptococcus образуют мелкие (точечные)
сероватые колонии с прозрачной зоной гемолиза (β-
гемолитические) и колонии с зеленовато-бурым ореолом и
повышенной прозрачностью среды (α-зеленящие). На кровяном
агаре нередко рост стрептококков подавляется быстрорастущей
другой микрофлорой воздуха. Поэтому учет лучше вести на
чашках с элективными средами - Гарро и Туржецкого, в которые
для подавления сопутствующей флоры добавляется генциан
фиолетовый, обладающий бактериостатическими свойствами в
86
отношении сапрофитов воздуха. Культивирование проводят при
37
0
С. После подсчета выросших колоний из подозрительных на
стрептококки делают мазки (стрептококки располагаются
короткими цепочками или скоплениями) и затем пересевают на
кровяной агар или в сахарный бульон. В бульоне стрептококки
образуют цепочки, в чем необходимо убедиться с помощью
микроскопии мазков, приготовленных из характерного
придонного осадка (в виде хлопьев или крошек на дне пробирки
при прозрачном бульоне).
Опытным путем установлена следующая зависимость:
если в 2-х чашках после экспозиции в 20 мин развилось 2
колонии, то воздух считают чистым, если 3-4- слабо
загрязненным. В классах после занятий исследователями
улавливалось до 50000 клеток зеленящего стрептококка в 1м
3
.
Таблица 3.1.
Биохимические свойства грамотрицательных бактерий [8]
БГКП Род бактерий
Наим.
теста
Citrobacter
Klebsiella
Enterobacter
Escerichia
Shigella
Proteus
Salmonella
1. Окраска по
Граму (24 ч)
- - - - - - -
2. Оксидаза 24 ч) - - - - - - -
3. Образование
индола
+ + - + [-]
+ только
vulgaris,
остальн. -
-
4. Р.Фогеса-
Проскауэра
- + + - - - -
5. Цитрат (среда
Симмонса)
[+] + + - - (+) +
6. Образование
сероводорода
- - - - - + +
7. Подвижность + - + + - + +
8. Гидролиз
желатины (22
0
С)
- - - - - + -
ПРИЛОЖЕНИЕ 3 отношении сапрофитов воздуха. Культивирование проводят при
370С. После подсчета выросших колоний из подозрительных на
Тесты для идентификации патогенных стрептококки делают мазки (стрептококки располагаются
и условно-патогенных микроорганизмов короткими цепочками или скоплениями) и затем пересевают на
Стафилококки кровяной агар или в сахарный бульон. В бульоне стрептококки
Морфологически Staphylococcus- грамположительные образуют цепочки, в чем необходимо убедиться с помощью
кокки, располагающиеся в виде характерных «виноградных микроскопии мазков, приготовленных из характерного
гроздей». Патогенные стафилококки на кровяном агаре придонного осадка (в виде хлопьев или крошек на дне пробирки
образуют колонии диаметром 2—3 мм, окруженные прозрачной при прозрачном бульоне).
зоной гемолиза; на молочно- или желточно-солевом агаре - Опытным путем установлена следующая зависимость:
колонии, окруженные зоной просветления (протеолитическая если в 2-х чашках после экспозиции в 20 мин развилось 2
активность) и радужным венчиком (наличие фермента- колонии, то воздух считают чистым, если 3-4- слабо
лецитовителлазы). загрязненным. В классах после занятий исследователями
Из подозрительных колоний делают высев на скошенный улавливалось до 50000 клеток зеленящего стрептококка в 1м3.
мясопептонный агар для выделения чистой культуры. После 24 Таблица 3.1.
ч инкубации при температуре 37°С проверяется Биохимические свойства грамотрицательных бактерий [8]
плазмокоагулирующая активность культуры посевом в
пробирки с 0,5 мл цитратной плазмы (человеческой или Род бактерий БГКП
кроличьей) в разведении 1:4. Патогенные стафилококки
Enterobacter
Citrobacter
Escerichia
Klebsiella
Salmonella
коагулируют плазму в течение 2—24 ч в условиях термостата. Наим.
Shigella
Proteus
Учет производят через 1, 2, 4 и затем 24 ч по образованию теста
небольшого желеобразного сгустка на дне пробирки.
Выделенные стафилококки подвергаются фаготипированию при
необходимости установления источника возникновения 1. Окраска по - - - - - - -
Граму (24 ч)
стафилококковой инфекции и путей распространения.
2. Оксидаза 24 ч) - - - - - - -
Стрептококки
3. Образование + + - + [-] -
остальн. -
+ только
vulgaris,
Один из представителей - Str.viridans (зеленящий индола
стрептококк) - постоянный непатогенный обитатель зева. На
кровяном агаре Streptococcus образуют мелкие (точечные)
сероватые колонии с прозрачной зоной гемолиза (β- 4. Р.Фогеса- - + + - - - -
гемолитические) и колонии с зеленовато-бурым ореолом и Проскауэра
повышенной прозрачностью среды (α-зеленящие). На кровяном 5. Цитрат (среда [+] + + - - (+) +
агаре нередко рост стрептококков подавляется быстрорастущей Симмонса)
другой микрофлорой воздуха. Поэтому учет лучше вести на 6. Образование - - - - - + +
чашках с элективными средами - Гарро и Туржецкого, в которые сероводорода
для подавления сопутствующей флоры добавляется генциан 7. Подвижность + - + + - + +
фиолетовый, обладающий бактериостатическими свойствами в 8. Гидролиз - - - - - + -
желатины (220С)
85 86
