ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
87
9. Образование
кислоты из D-
глюкозы
+ + + + + + +
10. Образование
газа из D-глюкозы
+ + + + - + +
11. Образование
кислоты из лактозы
(+) + + + - - +
12. Каталаза (24ч) + + + + + + +
13. Окисление-
брожение
брожение
брожение
брожение
брожение
брожение
брожение
брожение
Условные обозначения: +, - положительный (отрицательный) тест
наблюдается у 90-100% штаммов;
[+][- ]- 76-89% штаммов;
(+) (- )- 25-75% штаммов.
Escherichia coli
Колонии со среды Эндо пересевают в лактозный бульон с
борной кислотой или в желчно-лактозную среду с
бриллиантовым зеленым, предварительно нагретые до
температуры 43-44°С (в водяной бане), и сразу после засева
теплые пробирки помещают в термостат при температуре 43°С
на 24 ч. Борная кислота и бриллиантовый зеленый, добавляемые
в среды, являются ингибиторами сопутствующей флоры.
Появление газообразования свидетельствует о присутствии Е.
coli в исследуемой воде. Если нет возможности сделать посев в
лактозный бульон с борной кислотой, то идентификацию Е. coli
проводят по двум признакам: ферментация лактозы при
температуре 44,5°С в течение 24 ч и способности
образовывать индол. В этом случае подозрительные на Е. coli
колонии засевают параллельно в 2 пробирки: одну с полужидкой
средой с лактозой, вторую - со средой для определения индола
(бульон Хоттингера, пептонная вода или другая среда,
содержащая триптофан), под пробку пробирки вставляют
индикаторную бумажку на индол и инкубируют при
температуре 44,5°С. Посевом в пробирки со средой ФКП-1
88
идентификация упрощается, так как в этой среде содержатся
лактоза и триптофан. Положительный ответ дается при
образовании газа (разложение лактозы) и индола (ферментация
триптофана).
Тест Грегерсена
Этим тестом можно заменить окраску по Граму. В капле
3%-ного водного раствора КОН на предметном стекле
эмульгируют бактерийную массу, взятую с плотной среды.
Спустя несколько секунд после перемешивания за петлей
тянутся слизистые нити, что указывает на принадлежность
исследуемой колонии к грамотрицательному виду. Грам(+)
бактерии слизистые нити не образуют.
Каталазный тест
Наносят 1-2 капли 3% перекиси водорода непосредственно
на исследуемую колонию. Появление пузырьков
свидетельствует о выделении бактериями каталазы.
Оксидазный тест
Тест проводят с колониями микроорганизмов, выросшими
на среде Эндо. Часть подозрительных колоний стерильной
петлей переносят на фильтровальную бумагу, пропитанную
реактивом: диметил-п-енилендиамином и α-нафтолом. Если
микроорганизмы, выросшие на фильтре, выделяют оксидазу,
цвет колонии через 2—5 мин изменяется на сине-фиолетовый.
Такие колонии не учитывают при анализе воды. Можно на
фильтровальную бумагу с индикатором накладывать весь
фильтр с выросшими на нем колониями. Колонии БГКП темно-
красного цвета не изменяют своей окраски (так как кишечные
палочки оксидазоотрицательны) и учитываются как
представители фекального загрязнения воды.
В сомнительных случаях - при наличии колоний розовых
или бесцветных (лактозоотрицательных), не обладающих
оксидазной активностью, дополнительно определяют
способность бактерий ферментировать глюкозу при температуре
37° С и проявлять протеолитическую активность на среде Эндо с
молоком. Колонии учитывают как БГКП, если они образованы
грамоотрицательными палочками, ферментирующими глюкозу
до кислоты и газа и не обладающими протеолитической
активностью.
9. Образование + + + + + + + идентификация упрощается, так как в этой среде содержатся
кислоты из D- лактоза и триптофан. Положительный ответ дается при
глюкозы образовании газа (разложение лактозы) и индола (ферментация
10. Образование + + + + - + + триптофана).
газа из D-глюкозы Тест Грегерсена
11. Образование (+) + + + - - + Этим тестом можно заменить окраску по Граму. В капле
кислоты из лактозы
3%-ного водного раствора КОН на предметном стекле
12. Каталаза (24ч) + + + + + + +
эмульгируют бактерийную массу, взятую с плотной среды.
13. Окисление-
брожение Спустя несколько секунд после перемешивания за петлей
брожение
брожение
брожение
брожение
брожение
брожение
брожение
тянутся слизистые нити, что указывает на принадлежность
исследуемой колонии к грамотрицательному виду. Грам(+)
бактерии слизистые нити не образуют.
Каталазный тест
Условные обозначения: +, - положительный (отрицательный) тест Наносят 1-2 капли 3% перекиси водорода непосредственно
наблюдается у 90-100% штаммов; на исследуемую колонию. Появление пузырьков
[+][- ]- 76-89% штаммов; свидетельствует о выделении бактериями каталазы.
(+) (- )- 25-75% штаммов. Оксидазный тест
Тест проводят с колониями микроорганизмов, выросшими
Escherichia coli на среде Эндо. Часть подозрительных колоний стерильной
Колонии со среды Эндо пересевают в лактозный бульон с петлей переносят на фильтровальную бумагу, пропитанную
борной кислотой или в желчно-лактозную среду с реактивом: диметил-п-енилендиамином и α-нафтолом. Если
бриллиантовым зеленым, предварительно нагретые до микроорганизмы, выросшие на фильтре, выделяют оксидазу,
температуры 43-44°С (в водяной бане), и сразу после засева цвет колонии через 2—5 мин изменяется на сине-фиолетовый.
теплые пробирки помещают в термостат при температуре 43°С Такие колонии не учитывают при анализе воды. Можно на
на 24 ч. Борная кислота и бриллиантовый зеленый, добавляемые фильтровальную бумагу с индикатором накладывать весь
в среды, являются ингибиторами сопутствующей флоры. фильтр с выросшими на нем колониями. Колонии БГКП темно-
красного цвета не изменяют своей окраски (так как кишечные
Появление газообразования свидетельствует о присутствии Е. палочки оксидазоотрицательны) и учитываются как
coli в исследуемой воде. Если нет возможности сделать посев в представители фекального загрязнения воды.
лактозный бульон с борной кислотой, то идентификацию Е. coli В сомнительных случаях - при наличии колоний розовых
проводят по двум признакам: ферментация лактозы при или бесцветных (лактозоотрицательных), не обладающих
температуре 44,5°С в течение 24 ч и способности оксидазной активностью, дополнительно определяют
образовывать индол. В этом случае подозрительные на Е. coli способность бактерий ферментировать глюкозу при температуре
колонии засевают параллельно в 2 пробирки: одну с полужидкой 37° С и проявлять протеолитическую активность на среде Эндо с
средой с лактозой, вторую - со средой для определения индола молоком. Колонии учитывают как БГКП, если они образованы
(бульон Хоттингера, пептонная вода или другая среда, грамоотрицательными палочками, ферментирующими глюкозу
содержащая триптофан), под пробку пробирки вставляют до кислоты и газа и не обладающими протеолитической
индикаторную бумажку на индол и инкубируют при активностью.
температуре 44,5°С. Посевом в пробирки со средой ФКП-1
87 88
