Лабораторные работы по биофизике. Жуков В.В - 10 стр.

    1. Подготовить к работе фотоколориметр и самописец ЭПП. Фотоколори-
метр прогреть с раскрытой крышкой рабочей камеры в течение 10 мин. и ручка-
ми “Установка 100” установить стрелку на 0 (100 % пропускания). ЭПП про-
греть в течение 10 мин.
    2. Стерильным скарификатором проколоть палец и поместить 1-2 капли кро-
ви в 20 мл раствора. Проверить степень пропускания света взвесью. Если она
меньше 30 %, то добавить раствор Рингера и довести степень пропускания света
в предел 30 - 45%.
    3. Приготовить 0,005 н раствор соляной кислоты на растворе Рингера. К 2 мл
взвеси крови, помещенным в фотоколориметрическую кювету, влить 1 мл ки-
слоты. Засечь время по часам либо включить самописец; одновременно снять
нулевое показание колориметра. Если используются часы, отмечать показания
колориметра через каждые 30 с. Процесс гемолиза считается завершенным, ко-
гда показания прибора не изменяются (три числа подряд неизменны). Повторить
опыт.
    4. Взвесь форменных элементов крови и раствор кислоты подогреть на 10° С
относительно температуры воздуха. Провести аналогичные мероприятия и из-
мерения. Опыт повторить.
    5. Вычислить температурный коэффициент гемолиза и кажущуюся энергию
активации процесса.

   Упражнение 2. Влияние концентрации кислоты на скорость гемолиза

    Принадлежности: приборы те же, что и в упр. 1; растворы HCl в физраство-
ре с концентрациями: 0,0005 М, 0,001 М, 0,002 М, 0,005 М, 0,01 М, 0,02 М, 0,05
М.

                                 Ход работы

    1. Приготовить растворы соляной кислоты путем последовательного разбав-
ления. Исходная концентрация равна 0,1 М. Разбавление вести в соотношениях:
1:1; 1:1,5; 1:1; 1:1; 1:1,5; 1:1; 1:1.
    2. Начиная с меньшей концентрации, провести гемолиз взвесей эритроцитов,
добавляя по 1 мл раствора кислоты в 2 мл взвеси.
    3. Определить время 50% гемолиза по среднему значению оптической плот-
ности между начальной и конечной.
    4. Построить график зависимости скорости 50%-го гемолиза от логарифма
концентрации кислоты.

        Упражнение 3. Определение температурного коэффициента
       и энергии активации образования кислорода при фотосинтезе
                у роголистника (Ceratophyllum demersum L.)

                                                                            9