Цитогенетический мониторинг. Калаев В.Н - 48 стр.

                                       48
       В основу работы спектрофотометра СФ-46 положен принцип изме-
рения отношения двух световых потоков: потока, прошедшего через ис-
следуемый образец, и потока, прошедшего через контрольный образец.
       Световой пучок от источника света попадает в монохроматор и раз-
лагается дифракционной решеткой в спектр. В монохроматический пучок
света, поступающий в кюветное отделение, поочередно вводятся кон-
трольный исследуемый образец. Излучение, прошедшее через образец, по-
падает на фотоэлемент в приемно-усилительном блоке. Усилитель посто-
янного тока обеспечивает передачу сигналов на вход микропроцессорной
системы регистрирующего устройства. Процессор обрабатывает посту-
пившие сигналы, производит расчеты и высвечивает на табло значение ис-
следуемой величины.
        Поглощение света внешне проявляется в ослаблении светового по-
тока после прохождения через исследуемый объект. С помощью приемни-
ка излучения можно определить, во сколько раз интенсивность света пе-
ред образцом Iо окажется больше интенсивности света, прошедшего через
раствор I. Измеренная величина светопропускания Т=I/I o зависит от длины
волны падающего света и может служить характеристикой данного образ-
ца. Однако величина светопропускания не пропорциональна концентрации
раствора, а связана с ней более сложной зависимостью, поэтому для опре-
деления концентрации вещества и характеристики его поглощения исполь-
зуют другую величину – оптическую плотность (D).
                                       D=εcl,
где ε – молярный коэффициент экстинкции (поглощения), который харак-
       теризует способность молекул поглощать свет с длиной волны l. Он
       определяется структурой вещества и не зависит от его концентрации
       ε=[л/(моль х см)-1];
       с – концентрация вещества, моль/л;
       l - длина оптического пути, см.
       Группы атомов, поглощающих кванты света в УФ- и видимой облас-
тях спектра, называют хромофорами. Поглощение света обеспечивается
системой сопряженных связей (двойная связь, ароматические кольца и
т.д.). Гемсодержащие ферменты (пероксидаза) имеют достаточно простую
структуру, доступны в высокоочищенном состоянии, хорошо изучены, что
делает их удобными модельными системами.



Ход работы:
     1. Определить активность пероксидазы по окислению бензидина в
листьях традесканции Zebrina pendula Schnizl., подвергнутой облучению
радоном, и контрольных образцах.
     Метод определения основан на способности пероксидазы катализи-
ровать окисление бензидина (n,n’-диаминодифенил) в п-хинондиимин (n,n-
диаминодифенолхинон):