Физико-химические методы анализа органических соединений. Карпов С.И - 73 стр.

     10. Карандаш.
     11. Сканер.
     12. Пульверизатор.
                                  Выполнение работы
      1. Приготовление элюента и подготовка камеры для ТСХ
      Хроматографирование проводят в специальных камерах для ТСХ –
стеклянных круглых или прямоугольных емкостях с притертой крышкой.
На дно камеры наливают подвижную фазу – элюент.
      Элюентом в данной работе является смесь растворителей: амиловый
спирт – уксусная кислота – вода (2:1:1). Подвижную фазу готовят в от-
дельной колбе смешением 10 см3 амилового спирта, 5 см3 уксусной кисло-
ты, 5 см3 дистиллированной воды. Высота слоя элюента в камере должна
быть ~ 0,5 см.
      Камера с элюентом, плотно закрытая крышкой, должна постоять
20 мин, чтобы пространство насытилось парами элюента – это ускоряет
процесс хроматографирования.
      2. Приготовление растворов флавоноидов.
   Растворы флавоноидов приготавливают в мерных колбах на 10,00 см3 с
концентрацией 0,5; 1,0; 1,5; 2,5; 4,0 мг/см3 по навескам.
      3. Подготовка пластинки для ТСХ:
      а) для качественного анализа и количественного определения мето-
дом внутренней нормализации пластину для ТСХ марки «Sorbfil», «Sulifol»
или «Armsorb» или аналогичную размером кладут на стол и простым ка-
рандашом, без нажима, легко проводят линию, параллельную нижнему
краю пластины на расстоянии 1,5 см от края. Эта линия называется «линия
старта». На линии старта карандашом намечают точки, равно отстоящие
друг от друга и от краев пластины. Желательно, чтобы расстояние между
точками было не менее 1,5 см. Разметку пластины проводят аккуратно, не
нарушая слоя силикагеля.
      б) количественное определение методом калибровочного графика.
Разметку пластинки проводят, как указано выше, из расчета 5 точек для
растворов с определенным содержанием вещества и 1 точка для анализи-
руемого раствора (всего 6 точек).
      4. Нанесение проб на пластину:
      а) для качественного анализа и количественного определения мето-
дом внутренней нормализации в намеченные точки микрошприцем емко-
стью 1 мкл наносят 2 серии приготовленных растворов, разделяя пла-
стину на две части для последующей визуализации пятен различными
проявителями. Возможно использование двух пластин.
      Нанесение проб проводят легким прикосновением выдавленной из
иглы микрошприца капли к точке на пластине в несколько приемов (диа-
метр пятна должен быть не более 0,3 см3), проводя осушение поверхности

                                  73