Физико-химические методы анализа органических соединений. Карпов С.И - 72 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВГУ | Воронеж

Составители: 

Рубрика: 

72
РАБОТА № 10. КАЧЕСТВЕННОЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЛАВОНОИДОВ МЕТОДОМ ТСХ
Цель работы: определение качественного и количественного соста-
ва смеси флавоноидов методами внутренней нормализации и калибровоч-
ного графика с использованием видеоденситометрии.
Этапы работы
1. Приготовление элюента и подготовка камеры для ТСХ.
2. Приготовление растворов флавоноидов.
3. Подготовка пластинки для ТСХ.
4. Нанесение проб на пластину.
5. Хроматографирование анализируемых образцов.
6. Проявление хроматограмм.
7. Сканирование хроматограмм.
8. Качественный анализ хроматограмм.
9. Расчет параметров хроматографирования с использованием ви-
деоденситометра:
а) расчет треков;
б) качественный анализ состава анализируемой смеси и количест-
венное определение методом внутренней нормализации;
в) количественное определение методом градуировочного графика.
Аппаратура, условия и объекты хроматографирования
1. Камера стеклянная для ТСХ диаметром 90 мм, высотой 150 мм из
химически стойкого стекла.
2. Хромоскоп с УФ-излучением при λ = 254 нм.
3. Сушильный шкаф.
4. Микрошприц МШ-1 или Hamilton на 1,00 мкл.
5. Кверцитин (C
15
H
10
O
27
), рутин (С
27
Н
30
О
16
×3Н
2
О), нарингин
(С
27
Н
32
О
14
), +катехин (С
15
Н
14
О
6
×2Н
2
О).
6. Мерные колбы 2-10-2, ёмкостью 10,00 см
3
.
7. Пластинки, покрытые слоем силикагеля F
254
марки «Sorbfil», «Suli-
fol» или «Armsorb».
8. Подвижная фаза – смесь растворителей: амиловый спирт – уксус-
ная кислота – вода (2:1:1).
9. Проявители:
– аммиак 25 %;
– диазотированная сульфаниловая кислота (0,5 г сульфаниловой ки-
слоты растворяют в 12,5 мл концентрированной HCl и добавляют 75 мл
воды). Перед применением смешивают 4 мл приготовленного раствора с
1 мл 0,1 М NaNO
2
и 5 мл 2М NaOH (все растворы отмеряют пипеткой);
– 5 % водный раствор хлорида железа. 
         РАБОТА № 10. КАЧЕСТВЕННОЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
           ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЛАВОНОИДОВ МЕТОДОМ ТСХ

      Цель работы: определение качественного и количественного соста-
ва смеси флавоноидов методами внутренней нормализации и калибровоч-
ного графика с использованием видеоденситометрии.
                            Этапы работы
     1. Приготовление элюента и подготовка камеры для ТСХ.
     2. Приготовление растворов флавоноидов.
     3. Подготовка пластинки для ТСХ.
     4. Нанесение проб на пластину.
     5. Хроматографирование анализируемых образцов.
     6. Проявление хроматограмм.
     7. Сканирование хроматограмм.
     8. Качественный анализ хроматограмм.
     9. Расчет параметров хроматографирования с использованием ви-
деоденситометра:
        а) расчет треков;
        б) качественный анализ состава анализируемой смеси и количест-
венное определение методом внутренней нормализации;
        в) количественное определение методом градуировочного графика.
         Аппаратура, условия и объекты хроматографирования
      1. Камера стеклянная для ТСХ диаметром 90 мм, высотой 150 мм из
химически стойкого стекла.
      2. Хромоскоп с УФ-излучением при λ = 254 нм.
      3. Сушильный шкаф.
      4. Микрошприц МШ-1 или Hamilton на 1,00 мкл.
      5. Кверцитин (C15H10O27), рутин (С27Н30О16×3Н2О), нарингин
(С27Н32О14), +катехин (С15Н14О6×2Н2О).
      6. Мерные колбы 2-10-2, ёмкостью 10,00 см3.
      7. Пластинки, покрытые слоем силикагеля F254 марки «Sorbfil», «Suli-
fol» или «Armsorb».
      8. Подвижная фаза – смесь растворителей: амиловый спирт – уксус-
ная кислота – вода (2:1:1).
      9. Проявители:
      – аммиак 25 %;
      – диазотированная сульфаниловая кислота (0,5 г сульфаниловой ки-
слоты растворяют в 12,5 мл концентрированной HCl и добавляют 75 мл
воды). Перед применением смешивают 4 мл приготовленного раствора с
1 мл 0,1 М NaNO2 и 5 мл 2М NaOH (все растворы отмеряют пипеткой);
      – 5 % водный раствор хлорида железа.

                                    72

Страницы