Физико-химические методы анализа органических соединений. Карпов С.И - 80 стр.

                               Выполнение работы
      1. Подлинность цианкобаламина спектрофотометрическим методом.
      Одним из методов, позволяющих подтвердить подлинность вещества
в препарате, является молекулярная абсорбционная спектроскопия в УФ и
видимой области электромагнитных излучений в совокупности с другими
физико-химическими (хроматографическими, электрохимическими, дру-
гими оптическими) методами. Для подтверждения подлинности вещества
необходимо качественное (положение спектральных максимумов) и коли-
чественное соответствие (постоянство соотношений величин оптической
плотности при длинах волн, соответствующих максимумам поглощения).
      Приготовление раствора стандартного образца (РСО). Предвари-
тельно приготавливается промежуточный раствор с концентрацией 0,2 %
цианкобаламина в растворе. Для этого 0,1 г (0,05 г) (точная навеска) рас-
творяется в воде бидистиллированной или воде деионизованной в мерной
колбе емкостью 50,00 см3 (25,00 см3). Далее промежуточный раствор ис-
пользуется при приготовлении РСО с концентрацией 0,002 %. После рас-
творения вещества и интенсивного перемешивания 1,00 см3 (0,50 см3) пе-
реносят в мерную колбу емкостью 100,0 см3 (50,00 см3) и объем колбы до-
водится водой (бидистиллированной или деионизованной) до метки.
      Приготовление анализируемого раствора препарата. Для приготов-
ления рабочего раствора цианкобаламина (витамина В12) содержимое ам-
пулы (1 см3) количественно переносят в мерную колбу объемом 25,00 см3
и доводят до метки водой (бидистиллированной или деионизованной).
      Фотометрирование растворов РСО и раствора препарата, качест-
венный анализ содержания цианкобаламина в препарате.
      Для проведения фотометрирования подготовку спектрофотометра
СФ-4А или СФ-26 проводят в соответствии с руководством по эксплуата-
ции. Фотометрирование проводят с использованием дейтериевой лампы и
лампы накаливания и с фотоэлементом, соответствующим рабочему диа-
пазону длин волн. Рабочими и раствором сравнения заполняют кварцевые
кюветы с толщиной поглощающего слоя 10,00 мм. В качестве растворов
сравнения используется вода (бидистиллированная или деионизованная).
Проводят грубое фотометрирование раствора РСО в диапазоне длин волн
260 до 560 нм с шагом 10 нм.
      ВНИМАНИЕ. Все измерения проводят с использованием двух
ламп. Сначала выполняют все измерения с использованием дейтерие-
вой лампы (260–350 нм), а после этого проводят измерения с использо-
ванием лампы накаливания (350–560 нм).
      Данные измерений представляют в виде табл. 3.16 (см. работу 11).
При регистрации значений оптической плотности по аналоговой логариф-
мической шкале для увеличения точности определений проводят пересчет
величин А по величинам пропускания Т по уравнению (18а).

                                   80