Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 7 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВГУ | Воронеж

Составители: 

Рубрика: 

7
где I
0
, I – интенсивности света до и после его прохождения через
поглощающую среду (эти интенсивности сравнивают для учета потерь
света на отражение и рассеяние);
ε - коэффициент поглощения света, зависящий от длины волны и природы
вещества; при с = 1 моль/ л и l = 1 см он называется молярным
коэффициентом поглощения (единицы измерения – л/моль⋅ см );
c – концентрация вещества, поглощающего свет (моль/ л);
l - толщина светопоглощающего слоя (см );
А – абсорбционность (А= - lg I /I
0
).
Атом, ион или молекула, поглощая квант света, переходит в более
высокое энергетическое состояние. Обычно это – переход с основного
( невозбужденного ) уровня на первый возбужденный энергетический
уровень. Вследствие поглощения излучения при прохождении его через
слой светопоглощающего вещества интенсивность излучения уменьшается
и тем больше, чем выше концентрация светопоглощающего вещества.
В соответствии с уравнением (3) зависимость оптической плотности от
концентрации отображается прямой линией , выходящей из начала
координат (рис.1).
C
A
1
2
3
Рис.1. Зависимость абсорбционности от концентрации поглощающего
свет вещества в растворе при соблюдении закона Бугера – Ламберта -
Бера (1), положительных (2), и отрицательных (3) отклонениях от него
Линейная зависимость соблюдается не всегда. Поэтому , на практике
закон Бугера- Ламберта- Бера необходимо применять со следующими
ограничениями :
1) Закон справедлив для света строго определенной длины волны ;
2) Температура при измерениях должна быть постоянной ;
3) Коэффициент поглощения света (ε) зависит от показателя
преломления среды (для того , чтобы показатели преломления
исследуемого раствора и чистого растворителя оставались 
                                          7
гд е I0 , I – и нтенси вности света д о и после его прохожд ени я через
поглощ аю щ у ю сред у (э ти и нтенси вности сравни ваю т д ля у чета потерь
света на отражени еи рассеяни е);
ε - коэ ф ф и ци ент поглощ ени я света, зави сящ и й от д ли ны волны и при род ы
вещ ества; при с = 1 моль/л и l = 1 см он назы вается м олярны м
коэф ф ициентом поглощения (ед и ни цы и змерени я– л/моль⋅см);
 c – концентраци явещ ества, поглощ аю щ его свет (моль/л);
 l - толщ и на светопоглощ аю щ его слоя(см);
А – абсорбци онность(А= - lg I /I0).

    А том, и он и ли молеку ла, поглощ ая квант света, переход и т в более
вы сокое э нергети ческое состояни е. О бы чно э то – переход с основного
(невоз бу жд енного) у ровня на первы й возбу жд енны й э нергети чески й
у ровень. В след стви е поглощ ени я и з лу чени я при прохожд ени и его через
слой светопоглощ аю щ его вещ ества и нтенси вность и злу чени яу меньш ается
и тем больш е, чем вы ш еконцентраци ясветопоглощ аю щ его вещ ества.
    В соответстви и су равнени ем (3) з ави си мостьопти ческой плотности от
концентраци и отображается прямой ли ни ей , вы ход ящ ей и з начала
коорд и нат (ри с.1).

                   A                                   2



                                                                    1



                                                                3



                                                            C


Ри с .1. Зави с и м ос т ь абс ор бци о н н ос т и о т кон цен т р аци и поглощаю щего
с вет вещес т ва в р ас т вор е пр и с облю ден и и закон а Бугер а – Л ам бер т а -
Бер а (1), полож и т ельн ы х (2), и о т р и цат ельн ы х (3) о т клон ен и ях от н его

     Л и нейная з ави си мость соблю д ается не всегд а. П оэ тому , на практи ке
з акон Бу гера-Л амберта-Бера необход и мо при менять со след у ю щ и ми
ограни чени ями :
     1) Законсправед ли в д лясвета строго опред еленной д ли ны волны ;
     2) Т емперату ра при и змерени ях д олжна бы тьпостоянной;
     3) К оэ ф ф и ци ент поглощ ени я света (ε) зави си т от показ ателя
         преломлени я сред ы (д ля того, чтобы показатели преломлени я
         и сслед у емого раствора и чи стого раствори теля оставали сь

Страницы